Buněčná linie je trvale zavedená buněčná kultura, která může být množena a pěstována za zvláštních podmínek. Několik buněčných linií, jako jsou rakovinné buněčné linie, hepatocyty a buňky kostní dřeně, jsou udržovány jako buněčné linie pro snadnější výzkum. Buněčné linie jsou připraveny z primárních kultur a mohou to být hlavně dva typy, a to adherentní buněčné kultury a suspenzní buněčné kultury. Buněčné linie odvozené z těchto kultur jsou tedy označovány jako adherentní buněčné linie a suspenzní buněčné linie. Adherentní buněčné linie jsou buněčné linie, ve kterých jsou primární kultury připojeny k pevnému nosiči, a jsou tedy buňkami závislými na ukotvení. Suspenzní buněčné linie jsou buněčné linie, ve kterých jsou kultury suspendovány v tekutém médiu, a buňky tedy zůstávají v tekutém médiu. Nejsou závislé na ukotvení. klíčový rozdíl mezi buněčnými liniemi Adherent a Suspension je závislost na ukotvení buněk. Adherentní buněčné linie potřebují pevnou podporu pro svůj růst, takže jsou závislé na ukotvení, zatímco buněčné linie suspenze jsou nezávislé na ukotvení a nepotřebují solidní podporu pro růst.
1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co jsou adherentní buněčné linie
3. Co jsou to suspenzní buněčné linie
4. Podobnosti mezi adherentními a závěsnými buněčnými liniemi
5. Srovnání bok po boku - Adherentní vs. závěsné buněčné linie v tabulkové formě
6. Shrnutí
Adherentní buněčné linie jsou buněčné linie, které jsou závislé na ukotvení. Proto tyto buněčné linie vyžadují stabilní podporu pro svůj růst. Většina extrahovaných buněk obratlovců (s výjimkou krvetvorných buněk) závisí na ukotvení. Proto se většina buněk obratlovců kultivuje spolu s adherentem, který zajistí stálý růst buněk.
Většina adherentních buněčných linií je usazena v nádobě ošetřené tkáňovými kulturami a jejich růst je omezen na oblast cévy nebo adherentní. Při ošetřování buněk pro kultivaci adherentních buněčných linií by měly být buňky disociovány trypsinizací a poté by měly být použity techniky opakovaného pasážování, aby se vytvořily adherentní buněčné linie. Běžné aplikace buněčných linií připravených z adherentních kultur jsou v cytologii a cytogenetice. Používají se také pro výzkumné účely.
Linie zavěšení buněk jsou nezávislé na ukotvení. Jsou odvozeny od suspenzní kultury, která může snadno růst v suspendovaném kapalném médiu. Kultury suspenzních buněk by se měly nepřetržitě míchat, aby se udržel růst. Lidské hematopoetické buňky jsou kultivovány hlavně jako suspenzní kultury, a proto jsou udržovány jako suspenzní buněčné linie, když jsou použity pro výzkumné účely.
Údržba suspenzních buněčných linií vyžaduje nepřetržité míchání a několik pasážovacích postupů. Růst suspenzních buněk je omezen koncentrací buněk v médiu. V průběhu času tedy růstové faktory a složky média vyčerpávají omezující růst buněk.
Obrázek 01: Suspenzní kultura Pseudomonas spp
Suspenzní buněčné linie jsou nejčastěji používaným typem primárních buněčných linií v komerční produkci. Většina mikrobiálních buněk se udržuje jako suspenzní buňky, kde se používají k extrakci užitečných sekundárních metabolitů, jako jsou antibiotika, vitaminy, aminokyseliny a proteiny. Kultury suspenzních buněčných linií poskytují mnohem vyšší produkty než adherentní buněčné linie a jsou méně pracné a vyžadují méně výdajů ve srovnání s adherentními buněčnými liniemi.
Adherentní vs závěsné buněčné linie | |
Adherentní buněčné linie jsou buněčné linie, ve kterých jsou primární kultury připojeny k pevnému nosiči. | Suspenzní buněčné linie jsou buněčné linie, ve kterých jsou kultury suspendovány v tekutém médiu, a buňky tedy zůstávají v tekutém médiu. |
Závislost na ukotvení | |
Adherentní buněčné linie jsou závislé na ukotvení. | Linie zavěšení buněk jsou nezávislé na ukotvení. |
Míchání | |
Adherentní buněčné linie nevyžadují agitaci. | Suspenze buněčných linií vyžadují míchání. |
Trypsinizace | |
Trypsinizace je přítomna v adherentních buněčných liniích. | Trypsinizace v buněčných liniích suspenze chybí. |
Tkáňová kultura ošetřená plavidla | |
Vyžaduje se v adherentních buněčných liniích. | V buněčných liniích suspenze se nevyžaduje. |
Výtěžek | |
Adherentní buněčné linie vedou k nižšímu výtěžku. | Suspenze buněčných linií vedou k vyššímu výtěžku. |
Udržování buněčných linií je důležitým procesem při kultivaci buněk pro živočišné buněčné kultury i pro kultivaci rostlinných tkání. Kromě toho jsou buněčné linie také udržovány pro mikrobiální buňky, které se široce používají v průmyslových procesech. Buněčné linie mohou být označeny jako adherentní buněčné linie nebo suspenzní buněčné linie. Adherentní buněčné linie jsou odvozeny od adherentních primárních buněčných kultur a jsou závislé na ukotvení. Suspenzní buněčné linie jsou odvozeny ze suspenzních primárních buněčných kultur. Tyto buňky existují v tekutém médiu a pro růst buněk je nutné nepřetržité míchání buněk. To je rozdíl mezi adherentními buněčnými liniemi a suspenzními buněčnými liniemi.
1. „Adherentní buněčná kultura vs. suspenzní buněčná kultura.“ Thermo Fisher Scientific. K dispozici zde
2. Lonza, primární buňky vs. buněčné linie. K dispozici zde
1.'Pseudomonas aeruginosa pyocyanin 'Podle Y tambe, (CC BY-SA 3.0) přes Commons Wikimedia