Rozdíl mezi CFU a MPN

Klíčový rozdíl - CFU vs. MPN
 

Kolonie tvořící jednotka (CFU) a nejpravděpodobnější číslo (MPN) jsou dvě metody používané k výčtu mikroorganismů ve vzorcích. Oba parametry se používají k detekci kvality vody a fekálních indikátorových bakterií ve vzorcích vody. Jednotka vytvářející kolonie je míra používaná pro výčet počtu životaschopných bakteriálních buněk nebo buněk hub ve specifickém objemu nebo hmotnosti daného vzorku. Standardní jednotka pro tento parametr je CFU / ml nebo CFU / g. Nejpravděpodobnější počet je další jednotka používaná k měření počtu životaschopných bakteriálních buněk v kapalném vzorku. Klíčový rozdíl mezi CFU a MPN je ten CFU se počítá z bakteriálních a houbových kolonií rostoucích na pevné agarové plotně zatímco MPN se počítá z životaschopných bakterií rostoucích v kapalném médiu.

OBSAH

1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co je CFU 
3. Co je MPN
4. Porovnání vedle sebe - CFU vs. MPN v tabulkové formě
5. Shrnutí

Co je CFU?

Kolonotvorná jednotka (CFU) je parametr, který měří počet životaschopných bakteriálních nebo hubových buněk v daném vzorku. Metoda, která počítá jednotky vytvářející kolonie, se označuje jako standardní počet desek. Životaschopné kolonie, které se objevují na agarových plotnách, jsou vyjádřeny jako CFU na 1 ml (kolonie tvořící jednotka na mililitr) vzorku pro kapaliny nebo CFU na 1 g (kolonie tvořící jednotka na jeden gram) vzorku pro pevné látky.

K měření CFU ve vzorku se používají dvě běžné metody. Oni jsou metoda rozprostřených desek a metoda nalití destičky. Tyto dvě metody jsou podporovány technikou zvanou sériové ředění. Sériově naředěné vzorky umožňují získat na agarovém povrchu počet kolonií. Známý objem vzorku může být nanesen na povrch agarové destičky nebo smíchán s agarem a nalit na desku. Destička se poté inkubuje a vzniklé kolonie se spočítají. Počet kolonií se vztahuje k počtu mikroorganismů v původním vzorku. Destičky, které vykazují příliš mnoho kolonií nebo příliš málo kolonií, jsou z počítání vyloučeny, protože výsledky nemusí být na těchto deskách statisticky přesné. Statisticky nejlepší rozsah je 30 - 300 kolonií na agarové plotně. Proto by měly být vybrány správné desky pro přesné stanovení počtu. Pro výše uvedenou funkci se provádí sériové ředění.

Jakmile spočítáte počet životaschopných kolonií na plotnách, CFU / ml lze vypočítat pomocí následující rovnice.

CFU na ml původního vzorku = počet kolonií na ředicím faktoru X na destičce

Faktor ředění = (1 / ředění destičky)

Například pokud dostanete 149 kolonií na desku 10^-4 ředění, pak lze počet bakterií v 1 ml původního vzorku vypočítat takto:

CFU / ml = (149) x (1/10^-4)

= 149 × 10⁴ nebo 1490000

= 1,49 x 10⁶

Obrázek 01: Kolonie formovací jednotka

Co je MPN?

nejpravděpodobnější číslo je alternativní opatření k CFU / ml. MPN také odhaduje životaschopné buňky v kapalném vzorku. Počítá organismy rostoucí v kapalné kultuře a je to převážně bakteriologická technika. Tato metoda je zvláště užitečná pro vzorky, které obsahují nízké koncentrace bakteriálních buněk; například mléko, pitná voda atd. Hodnota MPN je vyjádřena na 100 ml objemu. MPN se spoléhá na statistickou metodu založenou na teorii pravděpodobnosti. Existují statistické tabulky určené k nalezení hodnot MPN na 100 ml vzorku. Tyto tabulky ukazují výsledky při 95% mezích spolehlivosti.

Hodnota MPN je vypočtena po provedení techniky zvané metoda fermentace s více zkumavkami. Tři sady zkumavek obsahujících vhodné kultivační médium se naočkují třemi různými objemy vzorku, jako je 10 ml, 1 ml a 0,1 ml, a inkubují se pro růst. Po inkubační době se zkumavky vyhodnotí + (pozitivní) nebo - (negativní) na přítomnost nebo nepřítomnost růstu. Vzorek pozitivních a negativních výsledků je poté porovnán s tabulkou statistických pravděpodobností MPN pro odhad počtu mikroorganismů. Potom se pro 100 ml vzorku uvede hodnota MPN. MPN se široce používá k detekci koliformních bakterií přítomných ve vzorcích vody.

Obrázek 02: Tabulka MPN

Jaký je rozdíl mezi CFU a MPN?

CFU vs. MPN
CFU je míra používaná k vyjádření počtu životaschopných bakteriálních nebo houbových kolonií v daném vzorku.	MPN je alternativní opatření k CFU a měří počet životaschopných bakteriálních buněk v kapalném vzorku.
Jednotka
CFU / ml nebo CFU / g	MPN / 100 ml
Výpočet
CFU se vypočítá počítáním počtu kolonií pěstovaných na agarových plotnách.	MPN se vypočítá porovnáním pozitivních a negativních vzorců zkumavek se statistickou tabulkou MPN.
Technika sériového ředění
Před umístěním vzorků na agarové plotny se provede sériové ředění.	Sériové ředění se při výpočtu MPN normálně neprovádí
Metody
Metoda rozprostřeného plechu a metoda vylévaného plechu jsou dva typy metod prováděných k získání CFU.	Vícenásobná zkumavková fermentace je metoda prováděná k získání hodnoty MPN.

Shrnutí - CFU vs. MPN

Měření mikrobiálního růstu je nutné z mnoha důvodů. V závodech na zpracování potravin je nutné měřit úroveň a typ mikroorganismů v potravinách. V potravinářském průmyslu a medicíně je nutné zajistit účinné provádění sterilizačních ošetření. U čistíren odpadních vod je nutné rutinně brát mikrobiální počet. Při optimalizaci postupu v molekulární biologii je nutné změřit počet kolonií na plotnách. Proto existují různé metody měření výčtu a růstu. CFU a MPN jsou dvě takové metody široce používané v různých oborech. CFU je míra počtu životaschopných bakteriálních a houbových kolonií přítomných v daném vzorku. Vypočítává se pomocí standardní metody počítání destiček nebo životaschopné metody počítání destiček. MPN je další měřítko, které vyjadřuje počet bakteriálních buněk přítomných v daném objemu kapalného vzorku. Vypočítá se za použití metody vícenásobné zkumavky a MPN tabulky. To je rozdíl mezi CFU a MPN.

Stáhněte si PDF verzi CFU vs MPN

Můžete si stáhnout PDF verzi tohoto článku a použít ji pro účely offline podle citačních poznámek. Stáhněte si PDF verzi zde Rozdíl mezi CFU a MPN.

Reference:

"Jednotka vytvářející kolonie." Wikipedia. Wikimedia Foundation, 28. května 2017. Web. K dispozici zde. 01 červen 2017.
"Mikrobiologie - 014 - nejpravděpodobnější číslo." Mikrobiologie - 014 - nejpravděpodobnější číslo Mikrobiologický vysokoškolský program. N.p., n.d. Web. K dispozici zde. 01 červen 2017.

Obrázek se svolením:

1. “ Manuální počítání CFU ”Quentin Geissmann - vlastní práce (CC BY-SA 3.0) přes Commons Wikimedia
2. „OSC Microbio 00 EE MPNTable“ Od CNX OpenStax - (CC BY 4.0) přes Commons Wikimedia