DNA ligáza a DNA polymeráza jsou důležité enzymy podílející se na replikaci a mechanismu opravy DNA organismů. DNA ligáza je zodpovědná za spojení DNA fragmentů katalyzováním tvorby fosfodiesterových vazeb mezi nukleotidy. DNA polymeráza je zodpovědná za syntézu DNA z jejích stavebních bloků (nukleotidů) pomocí templátové DNA. Toto je klíčový rozdíl mezi DNA ligázou a DNA polymerázou.
OBSAH
1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co je DNA ligáza
3. Co je DNA polymeráza
4. Srovnání bok po boku - DNA Ligase vs DNA Polymerase
5. Shrnutí
DNA ligáza je enzym, který katalyzuje tvorbu fosfodiesterové vazby mezi 3'-OH a 5'-PO4 skupiny nukleotidů a usnadňuje spojení DNA fragmentů. Je také znám jako molekulární sešívačka. Tato schopnost umožňuje zaplnit mezery nebo zářezy DNA a spojit fragmenty Okazaki vytvořené během replikace DNA. DNA ligázy jsou vysoce užitečné v technologii rekombinantní DNA pro produkci rekombinantních molekul DNA. DNA ligáza spojuje požadovanou DNA s vektorovou DNA. Proto je pro organismy důležitým enzymem.
Enzym DNA ligázy závisí na kofaktoru a Mg2+ ionty pro svou funkci. V DNA ligázách pomáhají dva kofaktory. NAD+ působí jako kofaktor pro bakteriální DNA ligázy, zatímco ATP často působí jako kofaktorový virus a eukaryotické DNA ligázy. Akce eukaryotické DNA ligázy je dokončena třemi hlavními kroky.
Krok 01. DNA ligáza útočí na molekulu ATP a uvolňuje pyrofosfát (dvě fosfátové skupiny) a AMP a formuje meziprodukt ligáza-adenylát vazbou kovalentně s výsledným AMP.
Krok 02: Vytvořený enzymový meziprodukt AMP přenáší AMP na 5 'fosfát niklu a vytváří DNA - adenylát (5'-fosfátový kyslík řetězce DNA útočí na fosfor mezi ligasou a adenylátovým meziproduktem).
Krok 03: DNA ligáza katalyzuje útok 3'-OH nicku na DNA-adenylát, aby se připojila k polynukleotidům a uvolňuje AMP.
DNA ligázy jsou obvykle izolovány z bakteriofága T4 a široce se používají v technologii rekombinantní DNA.
Obrázek 01: DNA ligáza při opravě nick
DNA polymeráza je všudypřítomný enzym přítomný ve všech organismech zapojených do syntézy DNA a replikace genomu. Genetická informace přechází z rodičů na potomky pomocí DNA polymeráz. Katalyzuje syntézu nové DNA komplementární k existující DNA. DNA polymeráza přidává nukleotidy (stavební bloky nukleových kyselin) do 3 'OH skupiny sekvence primerů a pokračuje ve formování vlákna ve směru 5'. Většina DNA polymeráz má 5 'až 3' polymerázovou aktivitu a 3 'až 5' exonukleázovou aktivitu pro korekci.
Prokaryotické DNA polymerázy jsou popsány v pěti hlavních skupinách. Eukaryoty obsahují alespoň 16 různých DNA polymeráz. Všechny tyto DNA polymerázy jsou seskupeny do sedmi rodin, jmenovitě A, B, C, D, X, Y a RT (reverzní transkriptáza)..
Obrázek 02: Replikace DNA řízená DNA polymerázou
DNA ligáza vs. DNA polymeráza | |
DNA ligáza je enzym, který katalyzuje tvorbu fosfodiesterových vazeb mezi nukleotidy a spojuje fragmenty DNA dohromady. | DNA polymeráza je enzym, který katalyzuje syntézu DNA pomocí nukleotidů. |
Role v replikaci DNA | |
DNA ligáza je další enzym v replikaci DNA, který spojuje fragmenty Okazaki. | DNA polymeráza je hlavním enzymem při replikaci DNA. |
Požadavky | |
Závisí to na Mg2+ ionty a ATP / NAD+ kofaktory | Závisí to na templátu, nukleotidech, primerech a Mg2+. |
Funkce | |
DNA ligáza je důležitá pro rekombinaci DNA, opravu DNA a replikaci DNA. | DNA polymeráza je důležitá pro replikaci DNA, opravu DNA a technologii rekombinace DNA. |
DNA ligáza je důležitý enzym, který je potřebný pro spojení DNA fragmentů fosfodiesterovými vazbami. DNA polymeráza je hlavním enzymem důležitým pro novou syntézu DNA. Klíčovým rozdílem mezi DNA ligázou a DNA polymerázou je jejich funkce. Oba enzymy jsou však nezbytné pro opravu DNA, replikaci DNA a technologii rekombinantní DNA.
Odkaz:
Rossi, R., A. Montecucco, G. Ciarrocchi a G. Biamonti. "Funkční charakterizace T4 DNA ligázy: nový pohled na mechanismus působení." Výzkum nukleových kyselin. U.S. National Library of Medicine, 1. června 1997. Web. 11. března 2017
Martin, Ina V. a Stuart A. MacNeill. "ATP-dependentní DNA ligázy." Genomová biologie. BioMed Central, 2002. Web. 11. března 2017
Garcia-Diaz, Miguel a Katarzyna Bebenek. "Mnoho funkcí DNA polymeráz." Kritické recenze ve vědách o rostlinách. Americká národní lékařská knihovna, březen 2007. Web. 11. března 2017
Obrázek se svolením:
1. „Mecanismus opravování přezdívek bez přezdívek“ Autor: Jrmcnall - ChemDraw (CC BY-SA 3.0) přes Commons Wikimedia
2. „Replikační stroj Phage T7“ od Danykl - vlastní práce (CC BY-SA 4.0) přes Commons Wikimedia