Rozdíl mezi amplifikací genu a klonováním genu

klíčový rozdíl mezi amplifikací genu a klonováním genu je to, že Genová amplifikace je proces výroby mnoha kopií požadovaného genu in vitro polymerázovou řetězovou reakcí. Klonování genu je však proces výroby mnoha kopií požadovaného genu in vivo vytvořením rekombinantního plazmidu a jeho transformací na hostitelskou bakterii.

Gen je specifický fragment DNA, který kóduje protein. Organismus má tisíce genů. Navíc je možné multiplikovat DNA sekvence důležitých genů pomocí molekulárně biologických technik. Genová amplifikace a klonování genu jsou dva takové postupy. Oba postupy produkují mnoho kopií požadovaného genu. Existuje však rozdíl mezi amplifikací genu a klonováním genu, pokud jde o jejich metodologii.

OBSAH

1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co je genová amplifikace
3. Co je genové klonování
4. Podobnosti mezi amplifikací genu a klonováním genu
5. Porovnání bok po boku - zesílení genů vs. klonování genů v tabulkové formě
6. Shrnutí

Co je genová amplifikace?

Genová amplifikace je proces vytváření kopií konkrétního genu pomocí polymerázové řetězové reakce. K amplifikaci genu by DNA daného organismu měla být extrahována pomocí vhodného extrakčního protokolu DNA. Potom by měla být extrahovaná dvouřetězcová DNA denaturována, aby se získaly oddělené jednotlivé řetězce. Další krok zahrnuje použití PCR reakce k vytvoření kopií požadovaného genu. Kromě toho směs PCR obsahuje požadované primery, nukleotidy, enzym DNA polymerázy, templátovou DNA a další složky. Na konci programu PRC dochází k amplifikaci sledovaného genu.

Obrázek 01: Amplifikace genu

Genová amplifikace je navíc počátečním krokem v detekci specifické sekvence, identifikace organismu, diagnostikování chorob a vytváření genových knihoven atd..

Co je to Gene Cloning?

Klonování genů je metoda v genetickém inženýrství k vytvoření genových knihoven nebo k vytvoření mnoha kopií požadovaného genu. Tento proces zahrnuje výrobu rekombinantního plazmidu a transformaci rekombinantního plazmidu do hostitelské buňky, zejména bakteriální buňky. Klon je identická kopie původního organismu nebo molekuly. Klonování genu může vytvořit tisíce genových klonů.

Obrázek 02: Klonování genu

Jakmile je požadovaný gen identifikován, může být oddělen od genomu konkrétního organismu jeho omezením specifickými restrikčními enzymy. Poté pomocí stejného restrikčního enzymu by se plasmidy (vektory) měly otevřít, aby se vložil genový fragment. Pak se rekombinantní plazmid transformuje na hostitelskou bakterii pomocí různých metod, jako je elektroporace. Některé z rekombinantních plasmidů vstupují do hostitelských bakteriálních buněk. Pomocí antibiotika mohou být transformované bakterie vybrány, izolovány a kultivovány v čerstvém médiu. Tato technika tedy pomáhá získat miliony genových klonů.

Jaké jsou podobnosti mezi genovým zesílením a genovým klonováním?

• Genová amplifikace a klonování genů jsou dvě techniky molekulární biologie.
• V obou těchto technikách se konkrétní sekvence DNA nebo gen mnohonásobně nebo milionkrát násobí.
• Kromě toho jsou obě techniky nanejvýš důležité pro mnoho vědeckých oblastí.

Jaký je rozdíl mezi genovou amplifikací a genovým klonováním?

Genová amplifikace je proces, při kterém se vytvářejí kopie konkrétního genu in vitro metoda zvaná PCR. Na druhé straně, klonování genu je proces, při kterém se vytvářejí kopie konkrétního genu in vivo metoda konstruováním rekombinantních vektorů a jejich množením v živém organismu. Toto je klíčový rozdíl mezi amplifikací genu a klonováním genu. Genová amplifikace dále trvá jen několik hodin, zatímco klonování genů trvá několik dní. Proto to můžeme také považovat za rozdíl mezi amplifikací genu a klonováním genu. Navíc proces genové amplifikace vykazuje méně chyb, zatímco proces klonování genu vykazuje více chyb.

Následující infographic shrnuje rozdíl mezi amplifikací genu a klonováním genu.

Shrnutí - Gene Amplification vs. Gene Cloning

Genová amplifikace je proces vytváření kopií požadovaného genu pomocí polymerázové řetězové reakce za podmínek in vitro, zatímco klonování genu je proces vytváření kopií požadovaného genu pomocí rekombinantní molekuly DNA a živé bakterie / hostitelského bakterie. Toto je základní rozdíl mezi amplifikací genu a klonováním genu.

Odkaz:

1. „Molekulární klonování“. Wikipedia, Wikimedia Foundation, 2. srpna 2019, k dispozici zde.
2. „Zesílení genu.“ Genová amplifikace - přehled Témata ScienceDirect, dostupná zde.

Obrázek se svolením:

1. „PCR“ od Madprime - vlastní práce (CC BY-SA 3.0) přes Commons Wikimedia
2. „Kroky molekulárního klonování“ od Alexpicardal97 - vlastní práce (CC BY-SA 4.0) přes Commons Wikimedia