Rozdíl mezi HPLC a rychlou HPLC

klíčový rozdíl mezi HPLC a rychlou HPLC je to tlak čerpadla, který používáme pro HPLC, je přibližně 40 MPa, zatímco tlak čerpadla pro rychlou HPLC je přibližně 3 až 5 MPa.

Nejběžnější technikou, kterou používáme pro separaci složek směsi, je „kapalinová chromatografie“. K dosažení tohoto účelu existuje několik technik, z nichž je HPLC velmi populární. HPLC je zkratka pro High Performance Liquid Chromatography, která rychle a účinně identifikuje, kvantifikuje a oddělí složky kapalné směsi. Rychlá HPLC je speciální aplikace HPLC, která pozdně upoutala pozornost těch, kdo se zabývají studiem roztoků.

OBSAH

1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co je HPLC
3. Co je to rychlá HPLC
4. Porovnání bok po boku - HPLC vs Rychlá HPLC v tabulkové formě
5. Shrnutí

Co je HPLC?

HPLC je vysoce účinná kapalinová chromatografie. Využívá vysokého tlaku k tlačení rozpouštědel tak, aby procházely kolonou. Je to také ideální způsob, jak oddělit a studovat různé sloučeniny, jako jsou aminokyseliny, nukleové kyseliny, uhlohydráty, steroidy, antibiotika a uhlovodíky. HPLC má mnoho výhod oproti jiným metodám separace směsí, jako je vyšší rozlišení a rychlejší analýza. Odstraňuje potřebu přebalení a regenerace a nabízí lepší kontrolu nad parametry a tím zvyšuje účinnost separace. V ideálním případě se HPLC hodí pro aplikace ve velkém měřítku, protože může oddělit velmi malé částice a umožňuje použití vysokých tlaků, které usnadňují snadný průtok rozpouštědel.

Obrázek 01: HPLC kolona

Stručně řečeno, způsob práce techniky HPLC je následující. Nejprve bychom měli zavést vzorek do proudu mobilní fáze v diskrétních malých množstvích pomocí čerpadla. Tlak čerpadla by měl být udržován na 40 MPa. Tento proud mobilní fáze prochází kolonou HPLC. Potom komponenty ve vzorku také procházejí sloupcem. Jejich rychlost pohybu se však od sebe liší kvůli rozdílu v interakcích mezi složkami vzorku a adsorbentem uvnitř kolony. Tento adsorbent nazýváme stacionární fází, protože se nachází uvnitř kolony (nepohybuje se). Poté na konci sloupce můžeme odebrat vzorek, který se eluuje ze sloupce, a tak můžeme komponenty ve vzorku odebrat zvlášť..

Co je Fast HPLC?

Vědci z výzkumného ústavu Schering Plough nedávno vyvinuli techniku ​​rychlé HPLC, která je pokročilou verzí HPLC, protože umožňuje ještě rychlejší separaci sloučenin ze směsi. Tato technika, známá také jako rychlá HPLC, využívá 2,7um částice jádra siliky z taveného skla, které se vyrábějí fúzováním 0,5um porézního oxidu křemičitého na pevnou částici siliky. Tyto jedinečně vyrobené částice dělají postup separace velmi rychlý a to příliš při nízkém zpětném tlaku, než co používáme v HPLC.

Obrázek 02: Přístroje FPLC

Rychlá HPLC získává výsledky srovnatelné s UPLC, ale vědci se domnívají, že tato technika je vynikající, protože nevyžaduje velmi drahé vysokotlaké zařízení. Skvělé je, že rychlá HPLC nevyžaduje žádné nové laboratorní protokoly.

Jaký je rozdíl mezi HPLC a rychlou HPLC?

HPLC je vysoce účinná kapalinová chromatografie a rychlá HPLC je pokročilá forma vysoce účinné kapalinové chromatografie. Klíčový rozdíl mezi HPLC a rychlou HPLC je, že tlak čerpadla, který používáme pro HPLC, je kolem 40 MPa. Zatímco tlak pumpy pro rychlou HPLC je kolem 3-5 MPa. Kromě toho můžeme pomocí techniky HPLC separovat různé sloučeniny, jako jsou aminokyseliny, nukleové kyseliny, uhlohydráty, steroidy, antibiotika a uhlovodíky, zatímco technika rychlé HPLC se používá hlavně pro separaci proteinů.

Níže uvedený infographic uvádí více informací o rozdílu mezi HPLC a rychlou HPLC.

Shrnutí - HPLC vs Rychlá HPLC

HPLC je technika kapalinové chromatografie, která se stala velmi populární po celém světě. Fast HPLC je nová verze HPLC, vědci z ústavu Schering Plough vyvinuli tuto novou techniku. Klíčový rozdíl mezi HPLC a rychlou HPLC spočívá v tlaku čerpadla, který používáme pro separaci. To je; tlak čerpadla, který používáme pro HPLC, je kolem 40 MPa. Tlak čerpadla pro rychlou HPLC se však pohybuje kolem 3 - 5 MPa.

Odkaz:

1. „Vysoce účinná kapalinová chromatografie.“ Wikipedia, Wikimedia Foundation, 20. října 2018. K dispozici zde 
"Potřebujete rychlý systém, abyste mohli spouštět rychlou HPLC - nebo ano?" Rychlá HPLC - CHROMacademy. K dispozici zde  

Obrázek se svolením:

1. "HPLC kolom" Door Jmave, rcvanwijk - Eigen werk, (Public Domain) přes Commons Wikimedia  
2. ”Lab's FPLC” Stephen Helms from Dallas, TX, United States - FPLC naší laboratoře (CC BY-SA 2.0) přes Commons Wikimedia