Rozdíl mezi reverzní fází a normální fází HPLC

klíčový rozdíl mezi HPLC s reverzní fází a normální fází je to HPLC s reverzní fází používá polární stacionární fázi a méně polární mobilní fázi, zatímco HPLC s normální fází používá nepolární stacionární fázi a polární mobilní fázi.

HPLC s normální fází je nejstarší technikou HPLC, kterou Tswett použil ve svých separacích rostlinných extraktů; použil křídu ve skleněném sloupci. Byl to klasický způsob chromatografie, který vedl k pojmenování této „normální“ techniky. Na druhé straně HPLC s obrácenou fází je opakem běžné techniky, kterou vědci v poslední době vyvinuli.

OBSAH

1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co je HPLC na reverzní fázi
3. Co je to HPLC s normální fází
4. Porovnání bok po boku - reverzní fáze vs. HPLC s normální fází v tabulkové formě
5. Shrnutí

Co je HPLC na reverzní fázi?

HPLC s reverzní fází je chromatografická technika, při které používáme hydrofobní stacionární fázi. Ze všech metod HPLC používáme tuto metodu přibližně 70% kvůli její široké použitelnosti a reprodukovatelnosti. Stacionární fáze je nepolární a mobilní fáze je polární.

Vědci většinou používají vodnou směs vody s mísitelným polárním organickým rozpouštědlem, jako je acetonitril nebo methanol, jako mobilní fáze. Analyty tedy interagují s nepolární stacionární fází.

Co je to normální fáze HPLC?

Normální fáze HPLC je chromatografická technika, při které používáme hydrofilní stacionární fázi. Je to tradiční metoda HPLC, i když ji příliš nepoužíváme. Stacionární fáze je polární a mobilní fáze je nepolární. Ještě důležitější je, že mobilní fáze této techniky je 100% organická. To znamená, že na to není používána žádná voda.

Obrázek 01: Profil vzorku pro HPLC chromatogramy s normální a reverzní fází podle polarity složek v analytu.

Obvykle stacionární fáze obsahuje oxid křemičitý, kyano, diol, amino-vázané fáze atd. Mobilní fáze zahrnují organická rozpouštědla, jako je hexan, ethylacetát atd. Tato technika je založena na zadržení molekul rozpouštědla nebo analytu na polární stacionární fázi..

Jaký je rozdíl mezi reverzní fází a normální fází HPLC?

HPLC s reverzní fází je chromatografická technika, při které používáme hydrofobní stacionární fázi. Stacionární fáze této techniky je nepolární. Stacionární fáze je nepolární, zatímco mobilní fáze je polární. Vědci navíc používají jako mobilní fázi v HPLC s reverzní fází vodnou směs vody s mísitelným polárním organickým rozpouštědlem, jako je acetonitril nebo methanol. Zatímco HPLC s normální fází je chromatografická technika, ve které používáme hydrofilní stacionární fázi. Stacionární fáze této techniky je polární. Stacionární fáze je polární, zatímco mobilní fáze je nepolární. Kromě toho vědci používají jako mobilní fázi HPLC s normální fází organická rozpouštědla, jako je hexan, ethylacetát atd. Níže uvedený infographic představuje rozdíl mezi HPLC s reverzní fází a normální fází v tabulkové formě.

Shrnutí - reverzní fáze vs. HPLC s normální fází

Techniky HPLC s reverzní a normální fází jsou dvě techniky kapalinové chromatografie. Rozdíl mezi HPLC s reverzní fází a normální fází je ten, že HPLC s reverzní fází používá polární stacionární fázi a méně polární mobilní fázi, zatímco HPLC s normální fází používá nepolární stacionární fázi a polární mobilní fázi.

Odkaz:

1. Vody. "HPLC separační režimy." HPLC - vysoce výkonná kapalinová chromatografie vysvětlena: Waters. K dispozici zde