Většina výzkumných studií zahrnuje kultivaci živočišných buněk, a proto tyto studie vyžadují udržování živočišných buněčných linií za zvláštních podmínek růstu. Kultivace živočišných buněk je široce prováděna ve farmakologických studiích za účelem identifikace metabolismu léčiv, diagnostiky onemocnění a výzkumu rakoviny. Médium buněčné kultury je důležitým aspektem živočišné buněčné kultury. Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) a Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) jsou dvě kultivační média použitá při kultivaci živočišných buněk. RPMI je médium používané široce pro kultivaci savčích buněk v suspenzní kultuře. DMEM je modifikovaný typ bazálního média se zvýšenou koncentrací aminokyselin a vitamínů až čtyřikrát. DMEM se používá při kultivaci buněk v adherentních kulturách. Hlavní rozdíl mezi těmito dvěma médii je typ kultury médií. RPMI se používá na suspenzní kultury, zatímco DMEM se používá k kultivaci adherentních buněk.
1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co je RPMI
3. Co je DMEM
4. Podobnosti mezi RPMI a DMEM
5. Porovnání bok po boku - RPMI vs DMEM v tabulkové formě
6. Shrnutí
RPMI nebo Roswell Park Memorial Institute Medium se také označují jako RPMI 1640. Název média byl odvozen od institutu, ve kterém byla média objevena. Toto médium se běžně používá v živočišné buněčné kultuře, zejména pro růst savčích buněk. Původně byly vyvinuty pro růst lidských lymfocytů.
Následující složky jsou součástí RPMI.
Zvláštností RPMI je zvýšená koncentrace fosfátů v médiu. RPMI se používá v atmosféře 5% oxidu uhličitého. To poskytne maximální a optimální podmínky pro růst buněk. PH média je udržováno na 8,0 pomocí systému pufrujícího hydrogenuhličitan.
Obrázek 01: Buněčná kultura na Petriho misce
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) je modifikované médium, které je komerčně připraveno. Původní textura středního prášku je žlutá. V DMEM je koncentrace vitamínu zvýšena až čtyřikrát, čímž se zvyšuje obsah živin v médiu.
DMEM je také modifikován přidáním více solí, jako je dusičnan železitý, pyruvát sodný a některé neesenciální aminokyseliny, jako je serin a glycin. Rovněž se mění složení glukózy v médiu. Původní formulace se skládá z 1000 mg / l glukózy, zatímco v DMEM je koncentrace zvýšena až na 4500 mg / l. DMEM také vyžaduje doplnění sérového média, protože to není úplné médium. DMEM je nejčastěji doplněn fetálním hovězím sérem (FBS). FBS poskytuje požadované proteiny a růstové faktory pro kultivační proces.
PH média se mění po přidání hydrogenuhličitanu sodného. pH média před přidáním hydrogenuhličitanu sodného je kolem 6,80 - 7,40, zatímco pH po přidání hydrogenuhličitanu sodného leží v rozmezí 7,60 - 8,20. Skladovací teplota média je 2 - 8 0C.
Obrázek 02: DMEM
RPMI vs DMEM | |
RPMI je médium používané široce pro kultivaci savčích buněk v suspenzní kultuře. | DMEM je modifikovaný typ bazálního média se zvýšenou koncentrací aminokyselin a vitamínů. |
Přítomnost extrafosfátů | |
Přítomen v RPMI. | Chybí v DMEM. |
Použití | |
| Používá se k kultivaci buněk v adherentních kulturách. To je zvyklé,
|
Typy kultury | |
RPMI se používá pro suspenzní kultury. | DMEM se používá pro kultury s adherovanými buňkami. |
RPMI i DMEM se široce používají při kultivaci živočišných buněk, zejména pro kultivaci živočišných buněčných linií včetně lymfocytů in vitro. DMEM je modifikované bazální médium, kde je zvýšená koncentrace živin. RPMI vyvinutý Roswell Park Memorial Institute a je to také médium používané při kultivaci živočišných buněk, zejména pro savčí lymfocyty. Obě média jsou komerčně dostupná. To je rozdíl mezi RPMI a DMEM.
1. „RPMI Media - RPMI-1640 Media.“ Sigma-Aldrich. K dispozici zde
2. „Dulbeccovo modifikované Eaglovo médium - DME, DMEM.“ Sigma-Aldrich. K dispozici zde
1.'Cell Culture v malém Petri dis'By kaibara87 - původně zaslán do Flickru jako buněčná kultura (CC BY 2.0) přes Commons Wikimedia
2.'DMEM buněčné kultivační médium'By Lilly_M - vlastní práce (CC BY-SA 3.0) přes Commons Wikimedia