klíčový rozdíl mezi celkovým počtem buněk a počtem životaschopných buněk je to celkový počet buněk odhaduje všechny buňky včetně živých i mrtvých mikrobiálních buněk ve vzorku, zatímco životaschopný počet buněk odhaduje pouze živé mikrobiální buňky ve vzorku.
Počítání počtu organismů v populaci se považuje za nezbytné pro většinu experimentálních prací. Proto se snažíme analyzovat počet mikrobů ve vzorku pomocí přímých a nepřímých metod. Přímé měření zahrnuje metody, které počítají přímo počet buněk. Nepřímé měření zahrnuje měření některých parametrů, které mohou souviset s počtem buněk, jako je hustota buněk, suchá hmotnost atd. Některé metody kvantifikují pouze živé mikrobiální buňky ve vzorku. Životaschopný počet buněk je jednou z takových metod. Přímý mikroskopický počet kvantifikuje všechny buňky ve známém objemu média / vzorku pomocí mikroskopu. Proto počítá živé i mrtvé buňky. Je to typ celkového počtu buněk.
1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co je celkový počet buněk?
3. Co je počet životaschopných buněk
4. Podobnosti mezi celkovým počtem buněk a počtem životaschopných buněk
5. Srovnání vedle sebe - celkový počet buněk vs. počet životaschopných buněk v tabulkové formě
6. Shrnutí
Celkový počet buněk je metoda, která zahrnuje počítání všech buněk ve známém objemu média / vzorku pomocí mikroskopu a počítací komory (hemocytometr). Na rozdíl od životaschopných počtů se počítají živé i mrtvé buňky. Toto je tedy celkový počet, pokud během pozorování není aplikováno barvivo životaschopnosti. V mikroskopii jsou buňky pozorovány přímo pod mikroskopem a spočítány. Používá buněčnou suspenzi, která se skládá z mikrobiálních buněk. Pro snadné počítání a přesné měření lze provést ředění vzorku. Ve velmi vysokých / nízkých koncentracích buněk je získání celkového počtu buněk pomocí mikroskopu obtížný úkol.
Obrázek 01: Počítací komora - Hemocytometr
Počítací komory jsou snadné, levné a rychlé při celkovém počtu buněk. Nejdůležitější je, že počítací komory jsou užitečné pro počítání eukaryot a prokaryot. Počítáme buňky ve vybraných čtvercích známého objemu, abychom kvantifikovali celkový počet buněk.
Počet životaschopných buněk je metoda počítání živých mikrobiálních buněk ve vzorku. Počítá pouze živé buňky ve vzorku. Počet životaschopných destiček, membránová filtrace a nejpravděpodobnější počet je jen málo životaschopných technik počítání buněk. Tyto přístupy jsou založeny na růstu. Metoda počítání životaschopných destiček je výkonná metoda používaná v mnoha mikrobiologických oborech, včetně potravinářské a mléčné mikrobiologie, lékařské mikrobiologie, mikrobiologie životního prostředí, mikrobiální genetiky, rozvoje růstových médií a biotechnologie..
Nejběžnějším způsobem, jak spočítat životaschopné bakterie, je použít vzorek schopný tvořit kolonie na agarovém médiu. Počet desek lze provést dvěma hlavními způsoby: technika rozprostřených desek a technika nalévání desek. Známý objem vzorku může být rozprostřen buď na povrch agarové desky, nebo smíchán do agaru. Destička se poté inkubuje a vzniklé kolonie se spočítají. Počet kolonií souvisí s počtem mikroorganismů v původním vzorku. Životaschopné počty měří pouze ty buňky, které jsou živé a rostoucí.
Obrázek 02: Počet životaschopných destiček
Nejpravděpodobnější počet (MPN) je alternativou k metodám počítání destiček pro odhad hustoty populace životaschopných buněk. Počítá organismy rostoucí v kapalné kultuře a je tedy převážně bakteriologickou technikou. To je zvláště užitečné pro nízké koncentrace organismů, např. mléko, pitná voda.
Technika membránové filtrace je vhodnější, když jsou mikroby velmi zředěné jako v městském vodovodu. To se provádí jednoduše průchodem známého objemu kapaliny filtrem a inkubací na živném médiu. Počítají se kolonie, které se na filtru vyvíjejí, a počítají se bakterie na mililitr vzorku.
Celkový počet buněk uvádí všechny živé a mrtvé mikrobiální buňky ve vzorku. Naproti tomu počet životaschopných buněk vyjmenovává pouze živé buňky ve vzorku. Toto je klíčový rozdíl mezi celkovým počtem buněk a počtem životaschopných buněk. Celkový počet buněk je nezávislý na růstu kolonií na agarových plotnách, zatímco počet životaschopných buněk je technika založená na růstu a závisí na růstu mikrobiálních kolonií na agarových plotnách.
Níže uvedená informační grafika shrnuje rozdíl mezi celkovým počtem buněk a počtem životaschopných buněk.
Celkový počet buněk vyjmenovává živé i mrtvé mikrobiální buňky, zatímco životaschopný počet buněk vyjmenovává pouze živé buňky. Toto je klíčový rozdíl mezi celkovým počtem buněk a počtem životaschopných buněk. Počet životaschopných buněk je také technikou založenou na růstu, na rozdíl od celkového počtu buněk. Navíc vyžaduje inkubaci destiček až do získání viditelných kolonií. Počet životaschopných destiček, MPN a membránová filtrace jsou jen některé techniky životaschopného počtu buněk, zatímco přímá mikroskopie a použití hemocytometru jsou dvě techniky celkového počtu buněk..
1. „Počítání bakterií“. Lumen, k dispozici zde.
1. „Hemocytometr“ od Todda - původně odeslaný do Flickru jako 0356 (CC BY-SA 2.0) přes Commons Wikimedia
2. „Verdünnungsreihe mit Ausplattieren“ od Leberechtc - vlastní práce (CC BY 3.0) prostřednictvím Commons Wikimedia