Rozdíl mezi transformanty a rekombinanty

Klíčový rozdíl - transformanty vs. rekombinanty
 

Rekombinace a transformace jsou dva zásadní kroky v genetickém inženýrství, kde jsou vlastnosti organismu úmyslně modifikovány manipulací s jeho genetickým materiálem. Rekombinace je proces, při kterém se cizí DNA inkorporuje do vektorového genomu a vytvoří se rekombinantní molekula DNA. Transformace je dalším krokem, ve kterém je rekombinantní molekula vložena do hostitelského organismu. Hostitelská buňka nebo organismus usnadňují expresi rekombinantní molekuly. Klíčový rozdíl mezi transformanty a rekombinanty je v tom, že transformanty jsou buňky nebo organismy, které přijímají rekombinantní molekulu uvnitř a usnadňují expresi zatímco rekombinanty jsou vektory, které umožňují inzerci cizí DNA do jejího genomu a transportují do hostitelských transformantů pro expresi.

OBSAH
1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co jsou transformanty
3. Co jsou to Rekombinanty
4. Srovnání bok po boku - transformanty vs. rekombinanty
5. Shrnutí

Co jsou transformanty?

Transformanty jsou buňky nebo organismy, ve kterých je rekombinantní DNA absorbována pro expresi. Bakterie se běžně používají jako hostitelské organismy v genetickém inženýrství, protože se snadno pěstují, množí se a manipulují za laboratorních podmínek a proces transformace je ve srovnání s jinými organismy snadný. Nejoblíbenější hostitelskou bakterií používanou v genetickém inženýrství je bakterie E-coli.

Během transformačního procesu jsou hostitelské buňky indukovány, aby přijímaly rekombinanty. Některé hostitelské buňky však nepřijímají rekombinantní molekuly. Jsou známy jako netransformanty a buňky, které uvnitř obsahují molekuly rekombinantní DNA, jsou známé jako transformanty. Výběr transformantů z netransformantů se provádí pomocí selektovatelných markerů v molekulární biologii. Selektovatelné markery jsou vloženy do vektorového genomu společně s vložkou DNA. Běžně používané selektovatelné markery jsou geny rezistentní na antibiotika. Markerové geny usnadňují diferenciaci transformantů a pokračují v procesu. Po transformaci se bakterie pěstuje v médiu obsahujícím antibiotikum. Pouze transformanty jsou schopné růst na tomto médiu, protože obsahují rekombinanty uvnitř.

Jakmile je rekombinantní molekula DNA transformována uvnitř hostitelského organismu, může být cizí DNA integrována do genomu hostitelské buňky nebo zůstat neintegrovaná v cytoplazmě. K expresi a replikaci cizí DNA však dochází v hostitelském organismu a výsledkem je požadovaný výsledek.

Co jsou to Rekombinanty?

Rekombinantní je organismus nebo buňka, která má rekombinovaný genom obsahující cizí DNA. Rekombinanty jsou výsledkem procesu genetického inženýrství. Jsou uměle vytvořené in vitro vložením požadovaných genů a úpravou genomu. Bakteriální plazmidy a bakteriofágy často fungují jako rekombinanty v genetickém inženýrství. Má chiméru různých DNA. Rekombinantní molekula DNA přenáší cizí DNA do hostitelského organismu a způsobuje, že exprimuje a tvoří požadovaný produkt.

Rekombinantní molekuly jsou konstruovány za použití restrikčních endonukleáz a DNA ligáz. Požadovaný fragment DNA se oddělí od původního organismu a vloží se do vektoru, aby se vytvořil rekombinantní pro transformaci. Řezání požadovaného genu a otevření vektorového organismu by mělo být provedeno pomocí stejného restrikčního enzymu, aby se vytvořily kompatibilní lepivé konce, které by je spojily. Jakmile je cizí DNA začleněna do vektorového genomu, je známá jako rekombinantní nebo rekombinantní molekula DNA.

Obrázek 02: Rekombinantní DNA

Jaký je rozdíl mezi transformanty a rekombinanty?

Transformanty vs Rekombinanty
Transformanty jsou buňky, které mají uvnitř rekombinantní molekulu DNA.	Rekombinanty jsou nosné molekuly, které mají cizí DNA vloženou do vlastního genomu.
Exprese cizí DNA
Jsou to hostitelské buňky, které jsou schopné exprimovat rekombinantní DNA.	Měli by být schopni se v hostitelském organismu replikovat.
Výběr
Buňky, které lze snadno pěstovat a množit, jsou vybrány jako hostitelské buňky.	Musí být snadno extrahovatelné a měly by obsahovat volitelné markery.

Shrnutí - Transformanty vs Rekombinanty

Transformanty jsou buňky nebo organismy s rekombinantními molekulami DNA uvnitř nich. Rekombinanty jsou organismy nebo buňky, které prošly genetickou rekombinací a mají cizí DNA ve svých genomech. Bakteriální buňky se často používají jako hostitelské buňky pro transformaci a plasmidy a bakteriofágy se často používají jako vektory v technologii rekombinantní DNA. To je rozdíl mezi transformanty a rekombinanty.

Reference:
1. Griffiths, Anthony JF. "Výroba rekombinantní DNA." Úvod do genetické analýzy. 7. vydání. U.S. National Library of Medicine, 1. ledna 1970. Web. 08. dubna 2017
2. Cooper, Geoffrey M. „Rekombinantní DNA.“ Buňka: molekulární přístup. 2. vydání. U.S. National Library of Medicine, 1. ledna 1970. Web. 08. dubna 2017

Obrázek se svolením:
1. „Rekombinantní tvorba plazmidů“ Minestrone Soup na anglické Wikipedii (CC BY-SA 3.0) přes Commons Wikimedia