Rozdíl mezi transformací a transfekcí

Transformace vs. transfekce
 

Transformace a transfekce jsou dvě jednoduché techniky používané k zavedení cizího genu do hostitelské buňky. Tyto techniky však závisí na typu hostitelského nebo vektorového systému.

Co je buněčná transformace?

Transformace je technika používaná k zavedení genů do kvasinek a bakteriálních buněk. Tato technika obvykle způsobuje dědičné změny v genech, a proto je exprese genu trvalá. Bakteriální transformace byla poprvé zavedena v roce 1928 Frederickem Griffithem. Na počátku 70. let byla tato technika použita v roce 2007 E-coli. Během procesu transformace E-coli, buňky jsou namočeny v ledově chladném roztoku CaCl₂. Tento krok dělá E-coli buňky kompetentní. Poté se kompetentní buňky smísí s plazmidovou DNA a inkubují se na ledu po dobu 20 až 30 minut. Poté je vystaven krátkému tepelnému šoku, aby se umožnil přenos DNA do buňky. Nakonec se buňky umístí do živného média a inkubují se při 37 ° C po dobu 60-90 minut, aby se vytvořily plasmidy. Jakmile jsou tyto kroky úspěšně dokončeny, transformované buňky mohou být umístěny na vhodné médium pro propagaci buněk. Protože transformace je považována za neefektivní techniku, nelze ji použít pro přípravu klonových bank.

Co je transfekce buněk?

Transfekce je metoda zavedení cizího genu, obvykle do savčích buněk. Existují dvě metody transfekce; jmenovitě přechodná transfekce a stabilní transfekce. Při přechodné transfekci je genová exprese dostupná po omezenou dobu; změna genu tedy způsobuje dočasnou expresi. Tato transfekční metoda je jednoduchá a rychlá; proto může být používán rutinně. Jednou z nevýhod přechodné transfekce je obtížnost aplikace pro systémy syntézy proteinů ve velkém měřítku.

Během stabilní transfekce je cílový gen integrován do genomu hostitelské buňky, a proto je genová exprese permanentní, na rozdíl od přechodné transfekce.

Jaký je rozdíl mezi transformací a transfekcí?

• Transformace je zavedení genu do prokaryotické buňky (bakteriální a kvasinky), zatímco transfekce se obvykle nazývá zavedení genu do savčí buňky..

• Transformace vede k dědičné změně genů, zatímco transfekce může vést buď k dočasné expresi, nebo k trvalým změnám genů.