U prokaryot dochází k transkripci i translaci v cytoplazmě kvůli absenci jádra. V eukaryotní transkripci dochází v jádru a translace se vyskytuje v ribozomech přítomných na drsné endoplazmatické membráně v cytoplazmě.
Transkripce se provádí RNA polymerázou a dalšími přidruženými proteiny označovanými jako transkripční faktory. Může být indukovatelný, jak je vidět v časoprostorové regulaci vývojových genů, nebo konsitutivní, jak je vidět v případě genů udržujících dům, jako je Gapdh..
Translace se provádí multisubunitovou strukturou zvanou ribozom, která se skládá z rRNA a proteinů.
Transkripce začíná navázáním RNA polymerázy na promotorovou oblast v DNA. Transkripční faktory a vazba RNA polymerázy na promotor tvoří iniciační komplex transkripce. Promotor sestává z jádrové oblasti, jako je TATA box, kde se komplex váže. Právě v této fázi RNA polymeráza uvolňuje DNA.
Překlad začíná inicializačním komplexem. Ribozomová podjednotka, tři iniciační faktory (IF1, IF2 a IF3) a methionin nesoucí t-RNA vážou mRNA blízko startovacího kodonu AUG.
Během transkripce RNA polymeráza po počátečních abortivních pokusech prochází templátovým vláknem DNA ve směru 3 'až 5', čímž vytváří komplementární vlákno RNA ve směru 5 'až 3'. Jak RNA polymeráza postupuje, DNA řetězec, který byl přepsán, se převine zpět a vytvoří dvojitou spirálu.
Během translace se příchozí aminoacyl t-RNA váže na kodon (sekvence 3 nukleotidů) na A-místě a mezi novou aminokyselinou a rostoucím řetězcem se vytvoří peptidová vazba. Peptid se pak přesune o jednu pozici kodonu, aby se připravil na další aminokyselinu. Proces tedy pokračuje ve směru od 5 'do 3'.
Ukončení transkripce v prokaryotech může být buď Rho-nezávislé, kde je vytvořena vlásenková smyčka bohatá na GC, nebo Rho-dependentní, kde proteinový faktor Rho destabilizuje interakci DNA-RNA. V eukaryotech, když dojde k terminační sekvenci, je uvolněn RNA rodící se transkript a je polyadenylovaný.
Při překladu, když ribosom narazí na jeden ze tří stop kodonů, rozloží ribozom a uvolní polypeptid.
Konečným produktem transkripce je RNA transkript, který může tvořit kterýkoli z následujících typů RNA: mRNA, tRNA, rRNA a nekódující RNA (jako je mikroRNA). Obvykle v prokaryotech je vytvořená mRNA polycistronická a v eukaryotech je monocistronická.
Konečným produktem translace je polypeptidový řetězec, který se skládá a podrobuje posttranslačním modifikacím za vzniku funkčního proteinu.
Během post-transkripční modifikace v eukaryotech je přidán 5 'uzávěr, 3' polycas a introny jsou spojeny. U prokaryot tento proces chybí.
Objevuje se řada posttranslačních modifikací včetně fosforylace, SUMOylace, tvorby disulfidových můstků, farnesylace atd..
Transkripce je inhibována rifampicinem (antibakteriální) a 8-hydroxychinolinem (antifungální).
Translace je inhibována anisomycinem, cykloheximidem, chloramfenikolem, tetracyklinem, streptomycinem, erytromycinem a puromycinem.
Pro transkripci, RT-PCR, DNA microarray, in-situ hybridizaci, Northern blot, RNA-Seq se často používají pro měření a detekci. Pro translaci, western blotting, imunoblotting, enzymatický test, proteinové sekvenování, metabolické značení, proteomika se používá pro měření a detekci.
Crickova centrální dogma: DNA ---> Transkripce ---> RNA ---> Překlad ---> Protein
Genetický kód používaný při překladu: