Zatímco teoretická termodynamika interakcí antigen-protilátka je dobře známa, jejich praktické použití při detekci nebo stanovení autoprotilátek je vzácné. U funkčních protilátek umožňuje stanovení optimální afinity dosažení maximálního terapeutického přínosu. Afinita protilátek byla studována téměř půl století a od počátku afinitní chromatografie před třemi desetiletími se vyvinula v mocný nástroj. Afinita popisuje interakci v individuálním vazebném místě. Znalost afinity, jakož i vlastností konstruktu a antigenu je nezbytná pro vyhodnocení vazby mezi afinitou a účinností funkční protilátky. Kromě afinity však existuje ještě další vazebný koncept zvaný avidita, což je celková vazebná síla interakce mezi multivalentním antigenem a multivalentní protilátkou. Přes jasné rozdíly mezi těmito dvěma pojmy se často používají pojmy afinita a avidita bez rozdílu. Pojďme se na ty dva podívat.
Afinita je síla vazby paratopu jedné molekuly protilátky s odpovídajícím epitopem na molekule antigenu. Popisuje interakci v individuálním vazebném místě. Znalost afinity, jakož i vlastností konstruktu a antigenu je nezbytná pro vyhodnocení vazby mezi afinitou a účinností funkční protilátky. Je založen na stejných termodynamických principech, kterými se řídí jakákoli reverzibilní biomolekulární interakce, stejná vazebná síla, která umožňuje imunitním systémům bojovat s infekcemi. A síla se týká síly specifické vazby mezi protilátkou a jejím antigenem. Přesné a přesné vyhodnocení afinity pro interakci antigen-protilátka je důležité měření pro stanovení limitů afinity a stropu účinnosti pro terapeutickou protilátku. Z termodynamického hlediska je afinita vyjádřena jako součet všech atraktivních sil, které mají za následek zvýšení vazebné síly a odpudivé síly, které vedou ke snížení vazebné síly.
Avidita je další pojetí vazby, které je často zaměňováno s afinitou; ve skutečnosti oba termíny odkazují na koncept vazebné síly, s výjimkou avidity se vztahuje na celkovou sílu vazebné kapacity antigenu směsi polyklonálních protilátek. Avidita přichází na obrázek, když se multivalentní antigen váže na bivalentní protilátku v roztoku nebo když se protilátka váže na dvě monovalentní molekuly antigenu na povrchu. Na rozdíl od afinity popisuje avidita multivalentní vazbu mezi více vazebnými místy ligandu a ligátu. Zjednodušeně řečeno, avidita je vazebná síla mezi multivalentní protilátkou a multivalentním antigenem. Avidita nemůže být popsána termodynamickými termíny a je získána kinetickými měřeními. Avidita protilátky závisí na afinitách jednotlivých vazebných míst protilátky, ale je větší než vazebná afinita, protože všechny interakce protilátka-antigen musí být přerušeny současně, aby se protilátka kompletně disociovala.
Termíny afinita a avidita jsou někdy nevhodně používány jako synonyma. Ve skutečnosti oba pojmy odkazují na pojem závazné síly. Afinita je definována termodynamicky jako měření stupně asociace mezi protilátkou a antigenem, zatímco celková síla vázající multivalentní protilátku k multivalentnímu antigenu je označována jako avidita nebo jinak známá jako „funkční afinita“. Afinita je síla vazby vazebného místa protilátky k jednomu odpovídajícímu epitopu antigenu, zatímco avidita je celková síla antigen vázající kapacity směsi polyklonálních protilátek. Avidita je také označována jako funkční afinita.
Termín afinita označuje vnitřní asociační konstantu mezi protilátkou a univalentním ligandem, jako je hapten, zatímco termín avidita se používá k označení celkové vazebné energie mezi protilátkami a multivalentním antigenem. Asociační konstanta je míra afinity protilátky k epitopu. Avidita nemůže být popsána termodynamickými termíny a je získána kinetickými měřeními. Z termodynamického hlediska je afinita vyjádřena jako součet energie blízkých mezimolekulárních atraktivních a odpudivých sil mezi antigenním determinantem a jeho vazebným místem..
Afinita protilátky může hrát rozhodující roli při určování biologických aktivit protilátek. Je proto nutné být schopni charakterizovat protilátkovou odpověď z hlediska afinity a velikosti a také pochopit, jak afinita protilátky může ovlivnit konkrétní test. Termín avidita se někdy používá synonymně s afinitou, ale nejčastěji se používá k popisu schopnosti protilátek vytvářet stabilní komplexy s antigenem. Avidita je nahromaděná síla více afinit jednotlivých vazebných míst protilátky.
Přes jejich rozdíly se často používají pojmy afinita a avidita bez rozdílu. Afinita je síla vazby paratopu jedné molekuly protilátky s odpovídajícím epitopem na molekule antigenu a může být stanovena pouze jedním monovalentním fragmentem Fab. Je to součet všech atraktivních sil, které vedou ke zvýšení vazebné síly a odpudivé síly vedoucí ke snížení vazebné síly. Avidita, na druhé straně, je vazebná síla mezi multivalentní protilátkou a multivalentním antigenem a je také označována jako funkční afinita. Naměřená vazebná energie mezi protilátkami a jejich odpovídajícími antigeny odráží aviditu protilátek. Na rozdíl od afinity nemůže být avidita popsána termodynamickými termíny a je získána kinetickými měřeními.