klíčový rozdíl mezi agarovou jamkou a diskovou difúzní metodou při metodě difúze studní na agaru se extraktový roztok plní do díry nebo do jamky vytvořené na agarovém médiu, zatímco v metodě difúze na agarovém disku se na povrch agaru umístí filtrační papírový disk obsahující testovací roztok.
Mikroorganismy jsou původci mnoha nemocí. Existují různá antimikrobiální činidla, která ničí mikroorganismy a inhibují nebo zastavují jejich růst. Pro detekci antimikrobiální aktivity jsou k dispozici různé metody screeningu a hodnocení. Mezi nimi jsou běžně používané metody difúze a difúze agarových disků a metody difúze agarových disků in vitro analýza, což jsou agarové difúzní metody. Tyto metody jsou široce používány, protože nevyžadují specifikovaná zařízení a další vyhodnocení reprodukovatelnosti a standardizace. Obě metody závisejí na difúzi antimikrobiálního činidla přes agarové médium.
1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co je to difúzní metoda na agaru
3. Co je to metoda difúze na agarovém disku
4. Podobnosti mezi agarovou jamkou a diskovou difúzní metodou
5. Srovnání bok po boku - metoda Agar Well vs Disc Difusion Method ve formě tabulky
6. Shrnutí
Metoda difúze dobře agarem je jednou z nejlevnějších a nejjednodušších in vitro testy antimikrobiální aktivity. Pomocí této metody mohou být rostlinné extrakty a mikrobiální extrakty testovány na antimikrobiální aktivitu proti patogenním mikrobiálním druhům. Při této metodě se agarová deska inokuluje patogenním bakteriálním druhem pomocí techniky rozprostřených destiček. To se provádí rozptýlením známého objemu mikrobiálního roztoku po povrchu agaru pomocí skleněného rozprašovače. Poté se sterilním korkovým vrtákem asepticky vytvoří otvor nebo jamka (průměr 6 až 8 mm). Dále by jamka měla být naplněna extraktovým roztokem (testovacím roztokem) a poté by měly být destičky inkubovány při vhodné teplotě a za vhodných podmínek. Po inkubaci roztok antimikrobiálního extraktu postupně difunduje přes agarové médium a inhibuje růst testovaných bakteriálních druhů. Nakonec lze pozorovat inhibiční zónu a jako průměr se bere průměr zóny.
Podobně jako metoda difúze studní na agaru je metoda difúze na agarovém disku také rutinně používanou metodou testování antimikrobiální susceptibility v laboratořích. Při této metodě se na agarovém médiu udržuje filtrační papírový disk, který obsahuje testovaný roztok. Před tím by měla být agarová deska naočkována testovaným mikroorganismem. Potom se na agarové médium umístí disk s filtračním papírem, který obsahuje známou koncentraci extrakčního roztoku. Poté se destičky inkubují za vhodných podmínek.
Obrázek 02: Metoda difúze na agarovém disku
Po inkubaci difúzní roztok difunduje přes agarové médium a inhibuje mikrobiální růst. Po inkubaci se změří průměr inhibiční zóny a porovná se.
Difúzní metoda s agarovou jamkou je test antimikrobiální aktivity, při kterém se v agarovém médiu vytvoří díra a přidá se k ní extraktový roztok. Mezitím je metoda difúze na agarovém disku testem antimikrobiální aktivity, ve kterém je na agarové médium umístěn filtrační papírový disk obsahující známou koncentraci extraktového roztoku. To je klíčový rozdíl mezi agarovou jamkou a metodou diskové difúze. Proto je extrakční roztok přidán do agarové jamky nebo do otvoru v agarové difúzní jamkové metodě, zatímco extrakční roztok je přidán na filtrační papírový disk v agarové diskové difúzní metodě. Metoda difúze studny na agaru tedy nepoužívá filtrační papírový disk, zatímco metoda difúze na agarovém disku nevytváří agarové díry v agarovém médiu.
Předtím je vedle sebe porovnání rozdílu mezi agarovou jamkou a metodou difúze disku.
Agarové a diskové difúzní metody jsou dva typy metod testování antimikrobiální susceptibility. Obě metody jsou jednoduché a levné metody in vitro. V agaru, metodě difúze jamky, se na médiu vytvoří díra nebo jamka a poté se do jamky přidá extraktový roztok, aby se vyhodnotila antimikrobiální aktivita. Naproti tomu v metodě difúze na agarovém disku je extraktový roztok přidán na disk s filtračním papírem a poté umístěn na povrch agaru. To je klíčový rozdíl mezi agarovou jamkou a metodou diskové difúze.
1. Balouiri, Mounyr, et al. "Metody pro hodnocení antimikrobiální aktivity in vitro: přehled." Journal of Pharmaceutical Analysis, Elsevier, 2. prosince 2015, k dispozici zde.
1. „Agarová difúzní metoda 1“ od Sommer36 - vlastní práce (CC BY-SA 4.0) přes Commons Wikimedia