Rozdíl mezi Gramovým barvivem a kyselinou rychle

Klíčový rozdíl - Gram Stain vs Acid Fast

Bakterie jsou velmi malé mikroorganismy. Jsou průhledné a jejich detekce je obtížná za životních a nelakovaných podmínek. Proto jsou vyvinuty různé způsoby barvení pro usnadnění bakteriální detekce. Existují tři hlavní typy technik barvení: jednoduché barvení, diferenciální barvení a strukturální barvení. Diferenciální barvení je technika, která používá k rozlišení bakterií více než jedno barvení. Gramové skvrny a kyselinově rychlé skvrny jsou nejčastěji známé jako diferenciální skvrny. Gramovo barvení je technika diferenciálního barvení, která rozděluje bakterie na dvě skupiny známé jako gram-pozitivní bakterie a gram-negativní bakterie. Kyselina rychlá skvrna je diferenciální skvrna používaná k identifikaci kyselinově rychlejších organismů, jako je Mycobacterium z nekyselých rychlých organismů. To je klíčový rozdíl mezi barvením Gram a Acid Fast.

OBSAH

1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co je Gram Stain
3. Co je Acid Fast
4. Podobnosti mezi gramovou barvou a kyselinou rychle
5. Porovnání vedle sebe - Gram Stain vs Acid Fast v tabulkové formě
6. Shrnutí

Co je Gram Stain?

Gramovo barvení je důležitou technikou diferenciálního barvení používanou pro bakteriální identifikaci v mikrobiologii. Tuto techniku zavedl dánský bakteriolog Hans Christian Gram v roce 1884. Gramovo barvení rozděluje bakterie do dvou hlavních skupin s názvem grampozitivní a gramnegativní, které jsou velmi důležité při klasifikaci a identifikaci bakterií. Mikrobiologové provádějí barvení gramů jako počáteční krok při charakterizaci bakterií během studií.

Bakterie jsou seskupeny na základě rozdílů v jejich buněčné stěně. Gram pozitivní bakterie se skládají z silné peptidoglykanové vrstvy v jejich buněčné stěně, zatímco gram negativní bakterie se skládají z tenké peptidoglykanové vrstvy v jejich buněčné stěně. Výsledek barvení gramem bude založen na rozdílu v tloušťce peptidoglykanové vrstvy buněčné stěny.

Gramovo barvení se provádí za použití čtyř různých činidel; primární skvrna, mořidlo, odbarvovací činidlo a zbarvení čítače. Křišťálová violeť a safranin se používají jako primární a proti skvrny, zatímco gramy jód a 95% alkohol se používají jako mořidla a odbarvovače. Základní kroky barvení gramů jsou následující;

Na čisté sklíčko se připraví bakteriální nátěr, fixuje se a chladí.
Stěr je zaplaven křišťálovou fialovou na 1 - 2 minuty.
Stěr se propláchne pomalu tekoucí vodou z vodovodu, aby se odstranily nadměrné skvrny.
Grams jod se aplikuje na nátěr po dobu 1 minuty.
Stěr se propláchne pomalu tekoucí vodou z vodovodu
Stěr je promýván 95% alkoholem po dobu 2 - 5 sekund a propláchnut pomalu tekoucí vodou z kohoutku.
Roztěr se po dobu 1 minuty obarví safraninem
Stěr se propláchne pomalu tekoucí vodou z vodovodu, vysuší se a pozoruje se pod mikroskopem.

Na konci barvení gramem budou gramnegativní bakterie pozorovány v růžové barvě, zatímco grampozitivní bakterie budou pozorovány ve fialové barvě.

Obrázek 01: Gram negativní a grampozitivní bakterie

O výsledku barvení gramů rozhoduje tloušťka peptidoglykanové vrstvy v jejich buněčné stěně. Během odbarvovacího kroku se primární skvrna a mořidlo snadno odstraní z gramnegativních bakterií a stanou se bezbarvé, protože mají tenkou peptidoglykanovou vrstvu. Primární skvrna je zachována v gram pozitivních bakteriích, protože mají silnou peptidoglykanovou vrstvu. Barvení čítače nebude účinné pro grampozitivní bakterie kvůli retenci primární skvrny. Tudíž grampozitivní bakterie budou viditelné v primární barvě zbarvení, tj. Fialové barvě. Barvení čítače zabarví gramnegativní bakterie a budou viditelné ve vybírací barvě, což je barva safraninu. Proto je snadné rozdělit bakterie do dvou skupin podle gramového zbarvení a je cenný při bakteriální diferenciaci a identifikaci.

Co je Acid Fast?

Stálost kyselin je fyzikální vlastnost určitých bakterií, konkrétně jejich odolnost vůči odbarvení kyselinami během barvení. Jakmile jsou tyto organismy obarveny, odolávají odbarvovacím postupům založeným na zředěné kyselině nebo ethanolu, které jsou běžné v mnoha protokolech barvení. Těmto organismům je tedy dán název „kyselý půst“. Tato vlastnost se projevuje díky vysoké hladině voskového materiálu (kyseliny mykolové) v jejich buněčných stěnách. Tento test je kritický pro identifikaci Mycobacterium tuberculosis.

Obrázek 2: Acid Fast Mycobacteria

Toto kyselé rychlé barvení bylo vyvinuto Paulem Ehrlichem v roce 1882. Ehrlichova kyselá rychlá technika byla modifikována Ziehl-Neelsenem a nyní se používá častěji. Postup kyselého rychlého barvení zahrnuje tři různá činidla. Carbol fuschin se používá jako primární skvrna. Jako odbarvovací činidlo se používá kyselý alkohol. Jako čítačová skvrna se používá methylenová modrá. Postup barvení se provádí následujícím způsobem.

Primární skvrna (karbol fuchsin) se aplikuje na fixovaný vzorek na sklíčku (všechny buňky budou obarveny červeně).
Sklíčko se zahřívá parou po dobu 5 minut, což skvrny vnáší do buněk správně.
Poté se přidá odbarvovací roztok (Tím se odstraní červené barvivo ze všech buněk kromě kyselých rychlých bakterií).
Jako čítačová skvrna se přidá methylenová modrá (zbarví se všechny odbarvené bakteriální buňky).
Kyselé rychlé bakterie zůstávají červené, zatímco nekyselinové rychlé bakterie se modří.

Jaké jsou podobnosti mezi gramovou barvou a kyselinou rychle?

Gramovo barvení a kyselina rychle jsou dvě techniky diferenčního barvení.
Obě techniky rozdělují bakterie do dvou skupin.
Obě techniky používají dvě skvrny a jedno odbarvení.

Jaký je rozdíl mezi Gramovým barvivem a kyselinou rychle??

Gram Stain vs Acid Fast
Gramovo barvení je technika diferenciálního barvení, která rozděluje bakterie do dvou skupin Gram-pozitivní bakterie a Gram-negativní bakterie.	Acid Fast Stain je diferenciální skvrna používaná k identifikaci kyselých rychlých organismů od nekyselých rychlých organismů.
Primární skvrna
Křišťálová violeť je běžně používaná primární skvrna v gramovém barvení.	Karbol fuchsin je primární skvrna používaná v kyselém rychle.
Odbarvovací činidlo
95% alkohol se používá jako odbarvovací činidlo v gramovém barvení.	Kyselý alkohol se používá jako odbarvovací činidlo při kyselém půstu.
Counter Stain
Gramové skvrny používají safranin jako čítačové skvrny.	Kyselé rychlé skvrny používají jako čítačové skvrny methylenovou modrou.
Pozorování
Gramnegativní bakterie jsou pozorovány ve sbírkové barvě a grampozitivní bakterie ve fialové barvě.	Kyselé rychlé bakterie jsou pozorovány v červené barvě a nekyslé rychlé bakterie v modré barvě.

Shrnutí - Gram Stain vs Acid Fast

Vizualizace mikroorganismů v živém stavu je obtížná. Proto se biologické skvrny a postupy barvení značně používají ke studiu jejich vlastností. Diferenciální barvení je jeden typ barvicí techniky používané k rozlišení bakterií. Gramovo barvení a kyselé rychlé barvení jsou dvě techniky různého barvení. Gramové barvení rozlišuje gramnegativní bakterie a grampozitivní bakterie na základě tloušťky jejich buněčných stěn. Kyselé rychlé barvení odlišuje kyselé rychlé bakterie od kyselých rychlých bakterií na základě obsahu kyseliny mykolové v buněčné stěně. To je rozdíl mezi kyselým rychlým a gramovým skvrn.

Stáhněte si PDF verzi Gram Stain vs Acid Fast

Můžete si stáhnout PDF verzi tohoto článku a použít ji pro účely offline podle citace. Stáhněte si prosím verzi PDF zde Rozdíl mezi gramovým a kyselým rychle.

Reference:

1. Aryal, Sagar. "Acid-Fast Stain - Princip, Postup, Interpretace a Příklady." Online mikrobiologické poznámky. N.p., 8. května 2017. Web. K dispozici zde. 20. července 2017.
2. Diferenciální skvrny pro identifikaci bakterií: Gram, Acid-fast & Endospore. N.p., n.d. Web. K dispozici zde. 20. července 2017.

Obrázek se svolením:

1. „Lymfatická uzlina - atypická mykobakteriální infekce (MAI) - AFB skvrna“ od Yala Rosen (CC BY-SA 2.0) přes Flickr
2. „Gramová skvrna 01“ od Y tambe - soubor Y tambe (CC BY-SA 3.0) přes Commons Wikimedia

Věda a příroda