Rozdíl mezi gramovým barvením a kulturou

Klíčový rozdíl - Gram Stain vs Culture
 

Gramovo barvení je technika barvení, která se provádí k rozlišení bakterií do dvou skupin podle tloušťky peptidoglykanové vrstvy v jejich buněčné stěně. Kultura je metoda pěstování a udržování mikroorganismů v laboratorních podmínkách pro různé analýzy. Klíčovým rozdílem mezi gramovým barvením a kulturou je jejich funkce; gram kmen barvicí technika bakterií, kde je kultura metodou pěstování a udržování mikroorganismů.

OBSAH
1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co je Gram Stain
3. Co je kultura
4. Porovnání bok po boku - Gram Stain vs Culture
5. Shrnutí

Co je Gram Stain?

Gramovo barvení je důležitou technikou diferenciálního barvení používanou pro bakteriální identifikaci v mikrobiologii. Tuto techniku ​​zavedl dánský bakteriolog Hans Christian Gram v roce 1884. Gramovo barvení rozděluje bakterie do dvou hlavních skupin: gram pozitivní a gram negativní; to jsou velmi důležité při bakteriální klasifikaci a identifikaci. Gramovo barvení se provádí jako počáteční krok pro charakterizaci bakterií.

Bakterie jsou seskupeny na základě rozdílů v jejich buněčné stěně. Gram pozitivní bakterie obsahují silnou peptidoglykanovou vrstvu ve své buněčné stěně, zatímco grampozitivní bakterie obsahují tenkou peptidoglykanovou vrstvu ve své buněčné stěně, jak je znázorněno na obrázku 01. Výsledek barvení gramem bude založen na rozdílu tloušťky v peptidoglykanové vrstvě buněčná stěna.

Obrázek 1: Gram pozitivní bakterie a Gram negativní bakterie

Gramovo barvení se provádí za použití čtyř různých činidel; primární skvrna, mořidlo, odbarvovací činidlo a zbarvení čítače. Křišťálová violeť a safranin slouží jako primární a proti skvrny, respektive gramy jódu a 95% alkoholu jako mořidla a odbarvovače.

Základní kroky gramů Stain

  1. Na čisté sklíčko se připraví bakteriální nátěr, fixuje se a chladí.
  2. Stěr je zaplaven křišťálovou fialovou na 1 - 2 minuty.
  3. Stěr se propláchne pomalu tekoucí vodou z vodovodu, aby se odstranily nadměrné skvrny.
  4. Grams jod se aplikuje na nátěr po dobu 1 minuty.
  5. Stěr se propláchne pomalu tekoucí vodou z vodovodu
  6. Stěr je promýván 95% alkoholem po dobu 2 - 5 sekund a propláchnut pomalu tekoucí vodou z kohoutku.
  7. Roztěr se po dobu 1 minuty obarví safraninem
  8. Stěr se propláchne pomalu tekoucí vodou z vodovodu, vysuší se a pozoruje se pod mikroskopem.

Na konci gramového barvení budou gramnegativní bakterie pozorovány v růžové barvě, zatímco grampozitivní bakterie budou pozorovány ve fialové barvě, jak je znázorněno na obrázku 02. Výsledek gramového barvení je rozhodován tloušťkou peptidoglykanové vrstvy v jejich buněčná zeď. Během odbarvovacího kroku se primární skvrna a mořidlo snadno odstraní z gramnegativních bakterií a stanou se bezbarvé, protože mají tenkou peptidoglykanovou vrstvu. Primární skvrna je zachována v gram pozitivních bakteriích, protože mají silnou peptidoglykanovou vrstvu. Čítačové skvrny nebudou účinné pro grampozitivní bakterie kvůli retenci primární skvrny. Takže grampozitivní bakterie budou viditelné v primární barvě zbarvení, tj. Fialové barvě. Čítačové barvení zabarví gramnegativní bakterie a bude viditelné ve vybírací barvě, která je barvou safraninu. Proto je snadné rozdělit bakterie do dvou skupin podle gramové skvrny a je užitečné při bakteriální diferenciaci a identifikaci.

Obrázek 2: Gramův kmen

Co je kultura?

Mikrobiální kultura je metoda kultivace a udržování mikroorganismů v laboratorních podmínkách pro různé účely. Kultury se pěstují v pevném, polotuhém a kapalném médiu na základě typu a účelu kultivace mikroorganismů. Kulturám jsou poskytovány nezbytné živiny a podmínky růstu vyžadované mikroorganismy. Existují různé složky kultivačního média, jako je zdroj energie, zdroj uhlíku, zdroj dusíku, minerály, mikroživiny, voda, ztužující činidlo atd. Optimální teplota, kyslík a pH by měly být upraveny podle typu pěstovaného mikroorganismu..

Existují různé typy mikrobiálních kultur; například šaržová kultura, kontinuální kultura, bodná kultura, kultivace na agarové plotně, kultivační půda atd. Podle složení růstového média existují různé typy kultivačních médií známých jako syntetická média, semisyntetická média a přírodní média. Mikrobiální kultury se připravují za sterilních podmínek ve speciální komoře zvané laminární proudění vzduchu. Pěstovací médium a skleněné nádobí se sterilizují před naočkováním požadovaného mikroorganismu. Za správných sterilních podmínek je cílový mikroorganismus přenesen do sterilizovaného živného média a inkubován při optimální teplotě. Uvnitř média bude mikroorganismus růst a množit se pomocí poskytnutých živin.

Obrázek 3: Bakteriální kultura na desce

Jaký je rozdíl mezi Gramem Stainem a kulturou??

Gram Stain vs Culture

Gramsův kmen je metoda diferenciálního barvení používaná pro bakteriální diferenciaci a identifikaci. Mikrobiální kultura je metoda pěstování mikroorganismů v laboratoři.
Komponenty
To používá různá činidla včetně dvou skvrn. To používá různá kultivační média, jako jsou pevná, polopevná a kapalná média složená z živin a dalších nezbytných podmínek.
Základní funkce
To umožňuje seskupení bakterií do dvou skupin: gramy negativní a gramy pozitivní. To umožňuje množení mikroorganismů pro různé účely.
Základna 
Gramovo barvení je založeno na rozdílech v peptidoglykanové vrstvě buněčné stěny.  Mikroorganismy budou růst a množit se uvnitř kultivačního média.
Výsledek
Gram negativní bakterie jsou viditelné v růžové barvě a gramy pozitivní bakterie jsou viditelné ve fialové barvě. Na plotnách lze vidět kolonie mikroorganismů. Na kapalných médiích jsou mikroorganismy v suspendované formě.

Shrnutí - Gram Stain vs Culture

Mikrobiální kultury se připravují a udržují v laboratorních podmínkách pro různé účely, jako je skladování, testování, chemické čištění atd. Gramovo barvení je barvicí postup, který rozlišuje bakterie do dvou hlavních skupin nazývaných gramnegativní bakterie a grampozitivní bakterie. Rozdíl mezi gramovým barvením a kulturou je proto, že gramové barvení je technikou barvení bakterií, zatímco kultura je metoda pěstování a udržování mikroorganismů v laboratořích.

Odkaz:
1. Aryal, Sagar. "Gramovo barvení: princip, postup, interpretace, příklady a animace." Online mikrobiologické poznámky. N.p., 20. září 2015. Web. 01.03.2017.
2. „Mikrobiologická kultura“. Wikipedia. Nadace Wikimedia, 1. února 2017. Web. 01.03.2017
3. Kumar, Sabarish. "Jaké jsou základní techniky mikrobiální kultury?" Jaké jsou základní techniky mikrobiální kultury? N.p., n.d. Web. 01.03.2017

Obrázek se svolením:
1. „Gram-cell-wall“ Graevemoore inglise Vikipeediast (CC BY-SA 3.0) přes Commons Wikimedia
2. „Gram Strain“ od Y tambe - soubor Y tambe (CC BY-SA 3.0) přes Commons Wikimedia
3. „Antraxová kultura“ od US Army Medical Research Institute of Infectious Diseases fotka - (Public Domain) přes Commons Wikimedia