Rozdíl mezi HPLC a HPTLC

Klíčový rozdíl - HPLC vs. HPTLC
 

Klíčovým rozdílem mezi HPLC a HPTLC je to HPLC umožňuje kvantitativní separaci složek ve vzorku, zatímco HPTLC neumožňuje kvantitativní separaci složek ve vzorku.

Chromatografie je metoda fyzické separace, která se používá k oddělení a identifikaci složek ve směsi. HPLC i HPTLC jsou chromatografické techniky. HPLC je vysoce účinná kapalinová chromatografie. HPTLC je vysoce účinná chromatografie na tenké vrstvě.

OBSAH

1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co je HPLC
3. Co je HPTLC
4. Porovnání bok po boku - HPLC vs. HPTLC v tabulkové formě
5. Shrnutí

Co je HPLC?

HPLC je vysoce účinná kapalinová chromatografie. Je to analytická technika používaná k oddělení, identifikaci a kvantifikaci složek ve směsi. V této technice je vzorek rozpuštěn ve vhodném rozpouštědle. Potom se rozpouštědlo se vzorkem nechá projít pumpou s daným tlakem. Čerpadlo je naplněno pevným adsorbčním materiálem. Pak se některé složky silně váží na absorpční materiál, zatímco jiné složky se vážou volně. To způsobí, že součásti mají různé průtokové rychlosti přes čerpadlo. Proto lze komponenty snadno oddělit.

Obrázek 01: HPLC systém

Adsorpční materiál, který plní čerpadlo, je známý jako stacionární fáze. Rozpouštědlo s rozpuštěným vzorkem je známé jako mobilní fáze. Čerpadlo použité v této technice se nazývá sloupec. Kolona je naplněna adsorpčním materiálem, nejčastěji částicemi oxidu křemičitého. Velikost těchto částic se může pohybovat v rozmezí 2 až 50 um. Proces separace je ovlivněn složením mobilní fáze a teplotou systému. Interakce mezi stacionární fází a složkou ve vzorku mohou být hydrofobní interakce, dipól-dipólové interakce, iontová vazba atd..

Provozní tlak HPLC je výrazně vyšší než v případě tradiční kapalinové chromatografie. Leží kolem 50-350 barů. Rozdíl mezi kapalinovou chromatografií a HPLC je ten, že v kapalinové chromatografii vzorek padá gravitační kolonou, zatímco v HPLC je vzorek natlakován kolonou. Velikost kolony a absorpčních částic jsou také velmi malé ve srovnání s tradiční kapalinovou chromatografií. Rozlišení dané technikou HPLC je však lepší.

Co je HPTLC?

HPTLC je vysoce výkonná chromatografie na tenké vrstvě. Je to pokročilá a automatizovaná forma tradiční TLC. Tato technika poskytuje efektivní rozlišení v krátkém časovém období. V této metodě analýzy lze vzorek a odkaz analyzovat současně, což umožňuje porovnání vzorku s referencí. Poskytuje zlepšenou analytickou přesnost než jiné chromatografické techniky. Čas potřebný k analýze je kratší. Tato technika je nízkonákladová.

Obrázek 02: Analýza potravinářských barviv pomocí HPTLC

Metoda HPTLC je jednoduchý proces a krok přípravy vzorku je rovněž eliminován (v tradiční TLC je krok přípravy vzorku zahrnut před separací. Tento krok zahrnuje čištění a obohacení). Rozpouštědlo může být použito přímo bez jakéhokoli předběžného zpracování, i když jiné chromatografické techniky vyžadují předběžné úpravy, jako je odplynění, filtrace atd..

Adsorpční materiál používaný v HPTLC je oxid křemičitý s velmi malými částicemi. V tradiční TLC je velikost částic oxidu křemičitého 5 až 20 um, zatímco v HPTLC je to 4 až 8 um. Vzorek se nanese na HPTLC destičku pomocí aplikátoru. Poskytuje jednotné a bezpečné použití. Poté se destičky umístí do komory mající mobilní fázi. Komora by měla být nasycena parou mobilní fáze. Po procesu HPTLC lze detekovat skvrny, které se přesunuly. Při detekci skvrn na destičce používá technika HPTLC vhodnou oblast UV nebo jódovou komoru.

Jaký je rozdíl mezi HPLC a HPTLC?

HPLC vs HPTLC
HPLC je vysoce účinná kapalinová chromatografie.	HPTLC je vysoce účinná chromatografie na tenké vrstvě.
Technika
V HPLC se mobilní fáze s rozpouštědlem nechá projít kolonou naplněnou stacionární fází.	V HPTLC je vzorek nanesen na TLC destičku a umístěn do komory obsahující mobilní fázi; potom se vzorek nechá migrovat směrem nahoru desku spolu s mobilní fází.
Měření
V HPLC se rozdíly mezi průtoky složek kolonou používají k oddělení složek ve vzorku.	V HPTLC se rozdíly mezi vzdálenostmi ujetými každou komponentou ve vzorku používají k oddělení komponent ve vzorku.
Kvantitativní separace
HPLC umožňuje kvantitativní separaci složek ve vzorku.	HPTLC neumožňuje kvantitativní oddělení složek ve vzorku.

Shrnutí - HPLC vs HPTLC

HPLC a HPTLC jsou dvě chromatografické techniky. Klíčový rozdíl mezi HPLC a HPTLC je v tom, že HPLC umožňuje kvantitativní separaci složek ve vzorku, zatímco HPTLC neumožňuje kvantitativní separaci složek ve vzorku..

Odkaz:

1. „Vysoce účinná kapalinová chromatografie.“ Wikipedia, Wikimedia Foundation, 10. dubna 2018, k dispozici zde.
2. „HPTLC“. LinkedIn SlideShare, 30. května 2011, k dispozici zde.

Obrázek se svolením:

1. „HPTLCplatetoMS“ od Kjaergaard na anglické Wikipedii - převedena z en.wikipedia na Commons (Public Domain) přes Commons Wikimedia
2. „HPLC“ od PD Dr. rer. nat. habil. Gertrud MorlockAsociační profesor (Privatdozentin) University of HohenheimInstitution of Food Chemistry - G. Morlock, C. Oellig, CAMAG Bibliography Service 103 (2009) via Commons Wikimedia