Rozdíl mezi HPLC a LCMS

Klíčový rozdíl - HPLC vs LCMS
 

Nejprve se podívejme na význam HPLC a LCMS, než analyzujeme rozdíl mezi HPLC a LCMS. Chromatografie je separační technika v chemické analýze, kde se složky vzorku oddělují během průchodu chromatografickým médiem. Zahrnuje také interakci se vzorkem, stacionární fází a mobilní fází. HPLC znamená Vysoce účinná kapalinová chromatografie, a používá se jako metoda kapalinové chromatografie v analytické chemii. Kombinace Kapalinová chromatografie a hmotnostní spektroskopie (LCMS) byl vyvinut pro kvantitativní analýzu vybraných biomolekul a je vysoce citlivý, přesný a specifický testovací postup ve srovnání s HPLC. To je klíčový rozdíl mezi HPLC a LCMC. Tento článek vás seznámí s HPLC a LCMC, které se zabývají chemickou analýzou, a diskutuje o rozdílech mezi HPLC a LCMS.

Co je HPLC?

Vysoce výkonná kapalinová chromatografie (HPLC) je populární separační technika v analytické chemii. Je to hlavně používá se k oddělení složek, k identifikaci a kvantifikaci každé složky ve směsi. Dříve byla tato metoda známá jako vysokotlaká kapalinová chromatografie protože to záviselo na čerpadlech, aby protékala stlačené kapalné rozpouštědlo obsahující směs vzorku skrze kolonu naplněnou pevným adsorpčním materiálem. Každá složka ve směsi vzorků interaguje odlišně s pevným adsorpčním materiálem, což vede k různým průtokům pro různé složky. To může vést k oddělení složek, jak vytečou z kolony HPLC.

HPLC se používá pro různé účely aplikace jako analýza hladin vitaminu D v krvi, nezákonné užívání drog sportovci detekcí zbytků léčiva v moči, třídění složek komplexního biologického vzorku pro výzkumné účely a analýzu a výroba léčiv.

Co je LCMS?

Kapalinová chromatografie-hmotnostní spektrometrie (LCMS) je analytická technika, která kombinuje fyzikální separační schopnosti kapalinové chromatografie s schopnostmi hmotnostní analýzy hmotnostní spektrometrie (MS). Kapalinová chromatografie je separační technika a hmotnostní spektrometrie se používá k analýze poměru hmotnosti k náboji nabitých částic. Fyzikální separace je obvykle dosaženo pomocí HPLC a alternativně LCMS také známá jako HPLC-MS. LCMS je a dominantní analytická technika to má velmi vysoká přesnost, citlivost a specifičnost ve srovnání s HPLC. Je tedy užitečný v mnoha aplikacích, jako jsou výzkumné účely, analýza léčiv, analýza potravin atd. LCMS je hlavně používá se k oddělení, detekci, identifikaci a kvantifikaci biochemických vlastností určitého vzorku v přítomnosti komplexních chemických směsí.

Jaký je rozdíl mezi HPLC a LCMC?

Zkratka a definice HPLC a LCMC

HPLC: HPLC znamená High-Performance Liquid Chromatography. Jedná se o separační techniku, která se používá hlavně k oddělení složek, k identifikaci a kvantifikaci každé složky ve směsi.

LCMS: LCMS znamenáKapalinová chromatografie a hmotnostní spektrometrie. Je to analytická technika, která kombinuje fyzikální separační schopnosti kapalinové chromatografie s schopnostmi hmotnostní analýzy hmotnostní spektrometrie (MS).

Charakteristika HPLC a LCMC

Klasifikace

HPLC: Toto je pouze metoda kapalinové chromatografie.

LCMS: Jedná se o kombinaci metody kapalinové chromatografie a metody hmotnostní spektrometrie.

Účinnost

HPLC: Ve srovnání s LCMS je analýza HPLC méně účinná a pomalejší.

LCMS: Ve srovnání s HPLC je LCMS analýza efektivní a rychlejší.

Citlivost

HPLC: Ve srovnání s LCMS je analýza HPLC méně citlivá.

LCMS: Ve srovnání s HPLC je LCMS analýza citlivější.

Specifičnost

HPLC: Ve srovnání s LCMS je analýza HPLC méně specifická.

LCMS: Ve srovnání s HPLC je LCMS analýza konkrétnější.

Přesnost

HPLC: HPLC poskytuje méně přesné výsledky než LCMS pro stanovení některých chemikálií.

LCMS: LCMS poskytuje přesnější výsledky než HPLC pro stanovení některých chemikálií.

Komponent

HPLC: HPLC lze považovat za součást LCMS.

LCMS: LCMS nelze považovat za součást HPLC.

Zdroj iontů

HPLC: Iontový zdroj v nástroji HPLC neexistuje.

LCMS: Iontový zdroj je přítomen v LCMS nástroji.

Aplikace

HPLC: Iony, polymery, organické molekuly a biomolekuly mohou být analyzovány pomocí HPLC.

LCMS: Organické molekuly a biomolekuly lze analyzovat. Na rozdíl od HPLC lze LCMS použít pro zkoumání neúplně rozdělených směsí.

Úkon

HPLC: Schéma přístroje HPLC je uvedeno na obrázku 1 a obvykle zahrnuje autosampler, pumpy a detektor. Vzorkovač zavádí směs vzorků do mobilní fáze (tlaková směs rozpouštědel, jako je voda, acetonitril a / nebo methanol), která ji převádí do kolony. Čerpadla dodávají požadovaný průtok a složení mobilní fáze kolonou. Kolona je naplněna adsorbentem, což je zrnitá pevná částice, jako je oxid křemičitý nebo polymery. Detektor vytváří signál úměrný množství přítomnosti složky vzorku ve koloně, což umožňuje kvantifikovatelnou analýzu vybraných složek vzorku. Přístroj HPLC je řízen a analýza dat je zajištěna digitálním mikroprocesorem a uživatelským softwarem.

Obrázek 1: Schéma přístroje HPLC

LCMS: Schéma LCMS přístroje je uvedeno na obrázku 2. Extrakt vzorku je vložen do kolony sestávající z HPLC. Tento sloupec zachovává metabolity vzorku na základě fyzických znaků a různé metabolity proudí do hmotnostního spektrometru v různých časových intervalech. Hmotnostní spektroskopie se používá pro hodnocení hmotností částic, pro stanovení elementárního uspořádání molekuly a pro objasnění struktur molekul. Vzorek by však měl být ionizován, aby se vytvořily nabité molekuly, aby se stanovily jejich poměry hmotnost-náboj. Proto místo nástrojů HPLC sestávají LCMS z dalších tří modulů, jako je zdroj železa, hmotnostní analyzátor a detektor. Zdroj iontů může transformovat vzorek plynné fáze na ionty a analyzátor hmotnosti seskupující ionty podle jejich hmot pomocí elektromagnetických polí. Nakonec detektor kvantifikuje hodnoty a doručí data každého iontu přítomného ve vzorku. Technika LCMS může být použita pro kvalitativní i kvantitativní aplikace.

  Obrázek 2: Schéma LCMS přístroje

Závěrem lze říci, že HPLC je metoda kapalinové chromatografie, zatímco LCMS je kombinací kapalinové chromatografie a hmotnostní spektrometrie. Obě tyto analytické techniky mají odlišné vlastnosti, ale lze je použít k identifikaci a kvantifikaci složení potravin, léčiv a dalších bioaktivních molekul.

Reference Arpino, P. (1992). Kombinovaná kapalinová chromatografie hmotnostní spektrometrie. Část III. Aplikace termospray. Recenze hromadné spektrometrie, 11: 3. Gerber, F., Krummen, M., Potgeter, H., Roth, A., Siffrin, C. a Spoendlin, C. (2004). Praktické aspekty rychlé vysokoúčinné kapalinové chromatografie s obrácenými fázemi za použití kolon s náplní částic 3μm a monolitických kolon ve farmaceutickém vývoji a výrobě pracující za současných správných výrobních postupů. Chromatografický deník, 1036 (2): 127-133. Lee, M. S. a Kerns, E. H. (1999). Aplikace LC / MS ve vývoji léčiv. Recenze hromadné spektrometrie, 18 (3-4): 187-279. Murray, K. K. (1997). Spojení laserové desorpce / ionizace pomocí matrice s kapalinovými separacemi. Recenze hromadné spektrometrie 16 (5): 283. Snímek se svolením: „Hplc“ od původního odesílatele byl Kjaergaard na en.wikipedia - přeneseno z en.wikipedia. (Public Domain) prostřednictvím Commons