Rozdíl mezi HPLC a UPLC

klíčový rozdíl mezi HPLC a UPLC je to HPLC umožňuje analýzu částic, které mají velikost kolem 5 mikrometrů, zatímco UPLC umožňuje mnohem menší částice okolo 2 mikrometrů.

HPLC i UPLC jsou kapalinové chromatografické techniky, které jsou užitečné při separaci složek sloučeniny. Abychom poznali rozdíl mezi HPLC a UPLC, musíme nejprve vědět, co je to HPLC. Je to proto, že UPLC je speciální verze HPLC a můžeme ji snadno pochopit, pokud víme, co je HPLC.

OBSAH

1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co je HPLC
3. Co je UPLC
4. Porovnání bok po boku - HPLC vs. UPLC v tabulkové formě
5. Shrnutí

Co je HPLC?

Termín HPLC znamená High Performance Kapalinová chromatografie. Je to technika, kterou můžeme použít k oddělení různých složek sloučeniny. Je to také nejpoužívanější technika pro identifikaci, kvantifikaci a oddělení složek směsi. Kromě toho tato technika používá k protlačování rozpouštědel kolonou vysoký tlak. Kromě toho jsou hlavní aplikace HPLC v biochemii pro analýzu složek sloučeniny. Je to ideální způsob pro separaci a identifikaci aminokyselin, nukleových kyselin, proteinů, uhlovodíků, pesticidů, uhlohydrátů, antibiotik, steroidů a bezpočtu dalších anorganických látek.

Obrázek 01: HPLC systém v laboratoři

Stručně řečeno, způsob práce techniky HPLC je následující. Nejprve bychom měli vzorek uvést do proudu mobilní fáze v malém množství pomocí čerpadla. Tlak čerpadla by měl být udržován na 40 MPa. Poté tento proud mobilní fáze prochází kolonou HPLC. Složky ve vzorku také procházejí sloupcem. Jejich rychlost pohybu se však od sebe liší. Tento rozdíl vzniká v důsledku rozdílu v interakcích mezi složkami vzorku a adsorbentem uvnitř kolony. Tento adsorbent nazýváme stacionární fází, protože se nachází uvnitř kolony (nepohybuje se). Za druhé, na konci sloupce můžeme odebrat vzorek, který se eluuje ze sloupce. Tam můžeme určit rozdíly v retenčních časech pro každou složku ve vzorku.

Co je UPLC?

Termín UPLC znamená Vysoce výkonná kapalinová chromatografie. Jedná se o variantu HPLC, ale způsob práce je stejný. Na rozdíl od HPLC však tato metoda umožňuje analyzovat velmi malé částice, jako jsou malé částice o velikosti 2 mikrometrů.

Obrázek 02: Zařízení UPLC

Navíc poskytuje rychlejší analýzu. V této technice používáme tlak 100 MPa pro vložení vzorku do kolony. Tento vysoký tlak tedy potvrzuje, že celý vzorek je zaveden do kolony. To je tedy velmi účinné ve srovnání s HPLC.

Jaký je rozdíl mezi HPLC a UPLC?

Pojem HPLC je zkratka pro vysoce výkonnou kapalinovou chromatografii, zatímco pojem UPLC je zkratka pro vysoce výkonnou kapalinovou chromatografii. Technika UPLC je proto vyvinutou verzí HPLC. Způsob provozu je tedy pro obě techniky stejný. UPLC je však ve srovnání s HPLC účinnější, protože používá vysoký tlak v pumpě; tlak čerpadla pro HPLC je 40 MPA, zatímco pro UPLC je 100 MPa. Jedná se tedy o rozdíl mezi HPLC a UPLC. Především je klíčovým rozdílem mezi HPLC a UPLC to, že HPLC umožňuje analýzu částic, které mají jejich velikost kolem 5 mikrometrů, zatímco UPLC umožňuje mnohem menší částice okolo 2 mikrometrů.

Shrnutí - HPLC vs UPLC

UPLC je forma HPLC. Operační metody jsou tedy stejné. Ale můžeme najít některé vylepšené funkce v UPLC ve srovnání s HPLC. Proto existuje určitý rozdíl mezi HPLC a UPLC. Klíčový rozdíl mezi HPLC a UPLC je v tom, že HPLC umožňuje analýzu částic, které mají jejich velikost kolem 5 mikrometrů, zatímco UPLC umožňuje mnohem menší částice kolem 2 mikrometrů.

Odkaz:

1. „Vysoce účinná kapalinová chromatografie.“ Wikipedia, Wikimedia Foundation, 20. října 2018. K dispozici zde
2. „UPLC.“ Wikipedia, Wikimedia Foundation, 25. října 2017. K dispozici zde  

Obrázek se svolením:

1. ”Hplc” od Kjaergaard na anglické Wikipedii (Public Domain) prostřednictvím Commons Wikimedia 
2. ”Obrázek zařízení UPLC” Autor Groep29 BFW - vlastní práce, (Public Domain), prostřednictvím Commons Wikimedia