Rozdíl mezi imunocytochemií a imunohistochemií

Klíčový rozdíl - imunocytochemie vs. imunohistochemie
 

Imunocytochemie (ICC) a imunohistochemie (IHC) jsou dvě široce používané techniky v molekulární diagnostice, která identifikuje a potvrzuje výskyt jak nekomunikovatelných nemocí, tak přenosných nemocí na základě molekulárních markerů přítomných v buňkách. Klíčový rozdíl imunocytochemie a imunohistochemie je molekula, která se v těchto technikách používá jako analytický postup. V ICC se používají primární a sekundární protilátky konjugované se markery, jako je fluorescence, zatímco pro diagnostická stanovení se používají IHC, monoklonální a polyklonální protilátky.

OBSAH

1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co je imunocytochemie
3. Co je imunohistochemie
4. Podobnosti mezi imunocytochemií a imunohistochemií
5. Porovnání bok po boku - imunocytochemie vs. imunohistochemie v tabulkové formě
6. Shrnutí

Co je imunocytochemie (ICC)?

ICC používá primární a sekundární protilátky vázané na markery, jako jsou fluorescenční markery nebo enzymy, a je to účinná metoda detekce k detekci antigenů přítomných na cílových buňkách, kterými mohou být buď infekční buněčné částice nebo rakovinné nádorové buňky. Pro imunocytochemii jsou vyžadovány tři typy kontrol.

• Primární protilátka - kontrola, která ukazuje specificitu vazby primární protilátky na antigen
• Sekundární protilátka - kontrola, která ukazuje, že značka je specifická pro primární protilátku
• Kontroly štítků - ukazují, že označení je výsledkem přidaného označení a ne výsledkem endogenního značení.

Obrázek 01: Imunocytochemie značí jednotlivé proteiny v buňkách (zde jsou tyrosinhydroxyláza v axonech sympatických autonomních neuronů zobrazena zeleně).

Primární protilátková kontrola je specifická pro každou novou protilátku a nemůže být opakována pro každý experiment. Kontrola sekundární protilátky je navržena na základě primární protilátky použité v experimentu a je součástí každého experimentu. Kontrola označení je zahrnuta, pokud se změní stav postupu, změní se vzorek nebo pokud se zjistí neočekávané označení.

Dvě hlavní aplikace ICC jsou Radio Immuno - Assay (RIA) a Enzyme linked Immunosorbent Assay (ELISA). Nejběžnější používanou protilátkou je imunoglobulin G.

Co je imunohistochemie (IHC)?

V imunohistochemii obsahuje zdrojový vzorek monoklonální a polyklonální protilátky, aby se stanovila přítomnost antigenů v cizích buňkách. Tato technika je založena na specifické reakci vazby antigen-protilátka. Protilátky použité při detekci mohou být značeny různými markery; mohou to být fluorescenční markery, radioaktivně značené markery nebo chemické markery. Prostřednictvím usnadnění in vitro Vazba mezi antigenem a cílenou protilátkou může být stanovena přítomnost nebo nepřítomnost konkrétního proteinu buňky.

Obrázek 02: Imunohistochemické barvení normální ledviny CD10

V současné době se vědci podílejí na vývoji cílových protilátek pro specifické antigeny přítomné v buňkách, které se mohou vyvíjet jako maligní nádorové buňky nebo antigeny přítomné v infekčních agens, jako je HIV.

Jaké jsou podobnosti mezi imunocytochemií a imunohistochemií?

• Reakce jsou vysoce specifické a přesné v ICC a IHC.
• Aplikace ICC a IHC zahrnují diagnostiku rakoviny a infekčních chorob.
• Sterilní podmínky by měly být udržovány v obou podmínkách a měly by být prováděny v roce 2007 in vitro
• Obě techniky poskytují reprodukovatelné výsledky.
• Oba jsou rychlé.
• Jako detekční metody v ICC i IHC se používají radioaktivní značení a fluorescenční techniky.
• Oba jsou založeny na párování antigen-protilátka.

Jaký je rozdíl mezi imunocytochemií a imunohistochemií?

Imunocytochemie (ICC) vs imunohistochemie (IHC)
ICC používá markery vázané na primární a sekundární protilátky, jako jsou fluorescenční markery nebo enzymy, a je účinnou detekční metodou pro detekci antigenů přítomných v cílových buňkách.	IHC je metoda, která používá monoklonální a polyklonální protilátky ke stanovení přítomnosti antigenů, což jsou speciální proteinové markery umístěné na buněčných površích.
Ukázkový zdroj
Vzorky odvozené z tkání, které byly histologicky zpracovány na tenké řezy, se používají v ICC.	IHC používá vzorky sestávající z buněk kultivovaných v monovrstvě nebo buněk v suspenzi, které jsou uloženy na sklíčku.
Zpracování vzorků
V ICC by buňky měly být propustné, aby usnadnily pronikání protilátky k intracelulárním cílům.	V IHC jsou buňky fixovány formalínem, zafixovány do parafinu před barvením.

Shrnutí - Imunocytochemie vs. Imunohistochemie

Molekulární diagnostika se používá k identifikaci a potvrzení výskytu nekomunikovatelných nemocí i přenosných nemocí na základě molekulárních markerů přítomných v buňkách. Molekulární markery mohou být proteiny nebo sekvence DNA nebo RNA; vývoj technologií, jako jsou ICC a IHC, připravil vědcům cestu k identifikaci nemoci a její příčiny v rané fázi. ICC i IHC závisí na specifických reakcích mezi protilátkou a antigenem, ačkoli zdroj vzorku. Hlavní rozdíl mezi imunocytochemií a imunohistochemií je zpracování vzorků těchto dvou postupů.

Stáhněte si PDF verzi imunocytochemie vs imunohistochemie

Můžete si stáhnout PDF verzi tohoto článku a použít ji pro účely offline podle citace. Stáhněte si PDF verzi zde Rozdíl mezi imunocytochemií a imunohistochemií.

Reference:

1. Burry, Richard W. „Kontroly pro imunocytochemii: aktualizace“. Journal of Histochemistry and Cytochemistry, SAGE Publications, leden 2011, k dispozici zde. Přístup k 24. srpnu 2017.
2. Duraiyan, Jeyapradha, et al. "Aplikace imunohistochemie." Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, srpen 2012, k dispozici zde. Přístup k 24. srpnu 2017.

Obrázek se svolením:

1. „Imunohistochemie“ autorem Swharden - vlastní práce (CC BY-SA 3.0) přes Commons Wikimedia
2. „Kidney cd10 ihc“ od Nephronu - vlastní práce (CC BY-SA 3.0) přes Commons Wikimedia