Rozdíl mezi SDS PAGE a gelovou elektroforézou

SDS PAGE vs. gelová elektroforéza

Elektroforéza může být použita pro zjištění hmotnosti předmětu obvykle pro protein a kyselinu deoxyribonukleovou (DNA). Řetězec DNA, pokud je zaveden do chemikálií, může urychlit nebo zpomalit informační proces. DNA markery známé hmotnosti se používají k přibližné velikosti objektů, které se pohybují po ukončení elektroforézy. Elektroforéza je s největší pravděpodobností nejpoužívanějším nástrojem molekulárních biologů a biochemiků.

V tomto procesu se běžně používají dva typy elektroforézy. Jedná se o elektroforézu na polyakrylamidovém gelu s dodecylsulfátem sodným (SDS-PAGE) a elektroforézu v nativním gelu.

SDS-PAGE je neselektivní metoda gelové elektroforézy, která se používá v oborech, jako jsou: biochemie, forenzní analýza, biologie a genetika k oddělení proteinu od jejich elektroforetické mobility. SDS je aniontová povrchově aktivní látka, která může být použita pro pomoc při lyžování buněk během extrakce DNA a pro separaci proteinů v SDS-PAGE. Při elektroforéze se nejprve směs zkapalní směs proteinu v roztoku SDS. Poté se aplikuje látka zvaná Mercaptoeetanol, aby se odstranily disulfidové vazby, aby se protein stal lineárním. Poté je zahájena elektroforéza. Výsledky by poskytly dva zbytky molekul, z nichž jeden je SDS-PAGE.

Absence SDS-PAGE není problém, protože gelová elektroforéza může být stále provedena pouze v případě, že proteiny neztrácejí veškerou svou sekundární a terciární strukturu a neotevírají se do obecně rovných tyčinek.

Mezitím nativní gelová elektroforéza používá gel jako antikonvektivní médium. Obvykle se používá pro separaci biologických makromolekul, jako je DNA, ribonukleová kyselina (RNA) a protein. Může být také použit pro separaci nanočástic.

V nativní gelové elektroforéze se používají dva hlavní gely, a to:

Agarózový gel, který se používá pro větší molekuly. Tento gel neidentifikuje malé rozdíly mezi dvěma molekulárními pásy. Používá se také výhradně pro separaci DNA. Vizualizace agarózového gelu se provádí směsí ethidiumbromidu.

Polyakrylamidový gel, který se používá pro menší molekuly. Tento gel identifikuje rozdíly mezi molekulárními pásy. Kromě DNA může také oddělit proteiny.

Souhrn:

1.SDS-PAGE je neselektivní metoda gelové elektroforézy, která se používá v oblastech, jako jsou: biochemie, forenzní analýza, biologie a genetika k oddělení proteinu od jejich elektroforetické mobility, zatímco gelová elektroforéza se obvykle používá k oddělení biologických makromolekul, jako je DNA, kyselina ribonukleová (RNA) a protein. Může být také použit pro separaci nanočástic.

2. Nativní gelová elektroforéza má dva typy, a to: agarózový gel a polyakrylamidový gel.